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- 杂交捕获技术是原位杂交吗
- 广东省汕头市南澳县
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想问一下杂交捕获技术检测HPV是采用的原位杂交技术吗?如果不是杂交捕获技术检测HPV与原位杂交HPV有何区别?谢谢?
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- RT-PCR问题求助
- 广东省广州市越秀区
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最近在做miRNA的RT-PCR。跑pcr是,两组明明是同一个cDNA稀释出来的,但用2-△△Ct法算出来后,结果却不是1:1,跑了好多次了,一直不知道哪儿原因,望大神们指教
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- 质粒提取求助
- 广东省广州市越秀区
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本人实验小白一枚,最近用含50ug/ml卡那霉素的270mlLB培养基摇菌16个小时,菌液浑浊,用全式金试剂盒大提质粒,离完心离心管里的菌团也是很多的,为什么最用只用200 ul的试剂盒里的洗脱液EB(加热到60度)洗脱,得到的质粒浓度
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- 实时荧光定量pcr求助
- 广东省广州市越秀区
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我的实验组总是会先增长后降低,请问这是为什么呀!!!求高手解答,我用的是Eva green染料
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- miRNA靶基因预测方法求助
- 广东省广州市萝岗区
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请问miranda,miRDB预测结果怎么能下载下来呢,下载下来后怎么能取交集呢,新手,刚开始学,实在是找不着方法,请指点
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- 用TRIZOL法提细胞RNA遇到一个问题
- 广东省广州市番禺区
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用TRIZOL法提细胞RNA,其他细胞都ok,有一个细胞提好多次(做了不同细胞量的对比),反转录PCR,GAPDH都批不出来,求大神把脉。
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- 请问高手单链DNA能做PCR吗?
- 广东省广州市海珠区
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学习抑制性消减杂交的原理中,说产物a(单链tester cDNA)没有引物结合位点所以不能扩增。这一点不能理解,产物a的一端不是也有接头吗,为什么引物不能识别?求大神指教!
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- 构建某基因点突变质粒转入细胞株中研究其功能,但细胞株
- 广东省广州市越秀区
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如题,构建某基因点突变质粒转入细胞株中研究其功能,但细胞株基因组野生型的也在那,会对功能有影响吗?换句话说,细胞株基因组野生型的基因在那,突变的质粒转进去有何用?问题可能有点傻傻的,但我还真的不懂,求
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- 求助各位大神,chip qpcr 阳参没有出来
- 广东省广州市越秀区
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求助各位大神,chip qpcr 阳参没有出来阳参是试剂盒里的Anti-RNA聚合酶,阳参没出来是怎么回事呢?
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- 急求!间接ELISA法建立,非特异性反应特别高
- 广东省广州市天河区
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这个elisa方法是准备建立起来检测人体内的一种抗体,包被的抗体是基因工程生产出来的该抗体的抗原,一抗是血清,二抗是辣根结合的羊抗人IgG抗体。实验步骤:100ul抗原包被4℃过夜→洗涤(5次,每次3min)→200ul5%BSA封闭37℃1h
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- 求推荐转录组microarray检测的公司
- 广东省广州市萝岗区
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请各位同学老师推荐下做转录组microarray检测的公司,做人的细胞,以前在华大做要3200一个样本,希望找到性价比最高的,求推荐,并把价格报上,谢谢!万分感谢!
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- 基因修饰老鼠,如何设计引物来验证该基因不同转录本表达
- 广东省广州市萝岗区
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我有一批基因修饰老鼠,该基因有12个转录本,我想验证下基因修饰过后,总mRNA及其12个转录本表达情况,我的引物该如何设计?引物如果设计在敲除片段之后,是不是不会有太大的表达差异?那么引物需要设计在缺失片段之内(
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- 设计引物求助
- 广东省广州市越秀区
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各位大神好,最近实验需要设计146,152,139的茎环引物,订了几次都不行,跑出来有双峰,求大神帮忙,这是原始序列hsa-miR-146a-5p_5p_GAGAAC_22_UGAGAACUGAAUUCCAUGGGUU_MIMAT0000449,hsa-miR-152-3p_3p_CAGUGC_21_UCAGUGCAUGACAGAACUUGG_MIMAT0000438 hsa-miR-139-5p_5p
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- 二代测序仪的准确度是怎么计算的?
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经常看到有报道说哪款测序仪准确度可以达到多高,比如illumina的测序仪准确度达到99.9%,又比如常听说三代测序的准确度偏低。我想问一下这个准确度是怎么计算的,有没有参考文献。
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- 如何寻找一个基因的非保守区?
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是不是找出一个基因的保守区其余的就是非保守区了、?最近打算做CRISPR CAS9但是我的基因是一个家族基因成员,我是不是要找出非保守区的序列 这样才能去设计gRNA呢?
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- 请问一下内质网应激和Ca-CaM-CaMKⅡ通路有没有关联性,
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请问一下内质网应激和Ca-CaM-CaMKⅡ通路有没有关联性,以及内质网应激和MLCK关系
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- 如何设计正向引物和反向引物?
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5’CTTCGAAATTC—基因1—TCTCCCGATCGG—基因2—AAGATCAAATCCTTTGCTCT 3’ 扩增基因1,如何设计正向引物和反向引物?
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- 质粒转染问题
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质粒带有GFP标签,总共三个,0组个为带GFP标签的空载体,1组、、2组为带GFP标签的目的基因质粒,转染HEK293总共转染四次。第一次用lipo2000,按照说明书转的,荧光显微镜下观察,三组均木有荧光。第二次用LIPO3000,荧光显微镜下观
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- 关于流式细胞仪做细胞凋亡
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过表达质粒转染细胞,以空载质粒做对照,48h后检测对凋亡的影响。请问定象限的时候是用空载质粒的对照组,还是需要用未转染的正常细胞?
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- 请问pet32a和pGEX-4T-1那个好?
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经常要表达细菌或真核生物的蛋白,细菌的一般不要求活性,主要是用于做免疫原,真核生物的一般要求要有活性,但是经常面对选择表达载体的时候犯愁,pet32a和pGEX-4T-1作为最常用的表达载体,究竟该选哪一个,那个比较适合
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