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  • 在看RACE相关的文章,大致的原理了解了一下,大概是先3’RACE,再5'RACE,最后通过这两个存在重复片段的产物来得到全长序列。那么问题来了,为什么要这么麻烦呢?直接在逆转录的时候给5'端加一个poly(C),利用3’端的poly(A)和5’
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  • 是这样的,我在做Northern blot电泳之后,用0.5 ug/mlEB泡染5min,ddH2O中泡1小时,2小时观察条带,都是拖尾,包括RNA Marker也是。 我的样品处理是,甲酰胺,甲醛,RNA,10*Mops,DEPC H2O,共20ul,PCR仪中65℃ 15min,4℃ hold。拿出置于冰上
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  • 我是用jc-1,标记的,biyuntuan的试剂盒做的。做成像cd11b的那种位移图吗?我试着做成像凋亡那种象限图,发现没变化,但是我计算了多聚体和单聚体的比值是有变化的。
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  • 1.IDT unafold会让我填一系列参数(温度、Na浓度、Mg浓度、Max foldings等),可以直接用默认值吗,还是说这个有什么讲究?2.对于同一段序列,软件会给出好几种二级结构,其△S、△H、△G不一样,这些参数是什么意思,该如何选择
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  • 最近在做糖化血红蛋白的测试条,对于血液样本的保存有一定的疑惑。血液在-20摄氏度冷冻,解冻后(4度或者室温解冻)发生溶血(变黑),测定糖化值和原来相比较极低。4摄氏度保存血液,预计有效期也就在2周不到。所以有
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  • 同一块胶PCR做出来的既有拖尾也有暗条带,这是怎么回事?急求高手指点,谢谢
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  • 最近遇到一个问题,困扰我一个礼拜了还是没解决啊。把来自荧光假单胞菌的基因克隆到ptrc99a质粒,然后转到DH5α进行表达,iptg诱导 0.1m诱导24h 0.5mM诱导24h,SDS-PAGE凝胶是看不出来,明显表达,测试酶活也没有 。连接的测序结果是
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  • 自配试剂大提质粒 新转化的大肠杆菌 比之前的质粒对照多出来一条第二条带下面的一条 想知道是为什么 怎么把那条带去除?
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  • 测序结果求教
  • 广东省广州市白云区
  • 10.00
  • 诚意金悬赏
  • 286人参与 | 5人投稿
  •   已结束
  • 用载体构建质粒导入大肠杆菌,挑克隆摇菌后提质粒送去测序,结果发现同一个基因两个测序结果不一样,一个确实一个碱基,一个多了一个碱基,请问原因是什么啊,谢谢大神
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  • 请教各位大侠,采用2- Δ Δ Ct法计算mRNA表达量的时候,每个样本的目的基因通过内参校正之后,得到Δ Ct。组内平均得到平均值±标准差。组间比较的时候,只能是干预组的Δ Ct平均值减去对照组的Δ Ct平均值吧?如果是这样的话,
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  • 1.在网上查找的信息以及论文来看只有miRNA与蛋白质,lncRNA,mrna的相互作用并没有miRNA之间的相互作用。2.构建共表达网络要计算基因之间的相似性对吗?那可以构建miRNA-miRNA的共表达网络吗?
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  • 各位大佬们好,本人刚开始做MDSC,有好多概念不是很理解。老板让我做MDSC的增殖实验。但是喔找个好多文献都没有关于MDSC的增殖实验说法,只有MDSC扩增后频数改变流式等方式检测。我就想问问MDSC可以用CFSE做增殖实验吗?有相
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  • 本人最近在做剂量依赖性实验,是将质粒转染到细胞中,分别设有vector GFP 未处理组以及目的质粒这四组,vector GFP组分别转染300ng,目的质粒组依次是300 250 200 150 100 50,请问是不是要保持所有组分总的质粒量一致,即300ng 是不是
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  • 我最近提精子RNA浓度可以但 A260/A280比值一直上不去,一般在1.5-1.65之间,这是什么问题,求各位大师指导?操作步骤如下:1、将冷冻精子从液氮罐中迅速取出后,在37 °C水浴锅上30S内解冻到1.5mL无RNA酶的离心管中(样品量160ul),
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  • 临床实验做的患者全血circRNA及mRNA的基因芯片。(没有测miRNA)目前发现circRNA有几百个有显著统计学差异,mRNA有几百个有显著差异。如何将circRNA与mRNA串起来,把故事说圆是目前的困境。circRNA除了对miRNA的海绵吸附作用,应该还有
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  • 想问一下杂交捕获技术检测HPV是采用的原位杂交技术吗?如果不是杂交捕获技术检测HPV与原位杂交HPV有何区别?谢谢?
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  • RT-PCR问题求助
  • 广东省广州市越秀区
  • 10.00
  • 诚意金悬赏
  • 334人参与 | 1人投稿
  •   已结束
  • 最近在做miRNA的RT-PCR。跑pcr是,两组明明是同一个cDNA稀释出来的,但用2-△△Ct法算出来后,结果却不是1:1,跑了好多次了,一直不知道哪儿原因,望大神们指教
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  • 质粒提取求助
  • 广东省广州市越秀区
  • 10.00
  • 诚意金悬赏
  • 373人参与 | 3人投稿
  •   已结束
  • 本人实验小白一枚,最近用含50ug/ml卡那霉素的270mlLB培养基摇菌16个小时,菌液浑浊,用全式金试剂盒大提质粒,离完心离心管里的菌团也是很多的,为什么最用只用200 ul的试剂盒里的洗脱液EB(加热到60度)洗脱,得到的质粒浓度
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  • 我的实验组总是会先增长后降低,请问这是为什么呀!!!求高手解答,我用的是Eva green染料
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显示 1~20 项 共 82 个需求
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