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- 萌新问个问题，RACE的意义在哪里？
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在看RACE相关的文章，大致的原理了解了一下，大概是先3’RACE，再5'RACE，最后通过这两个存在重复片段的产物来得到全长序列。那么问题来了，为什么要这么麻烦呢？直接在逆转录的时候给5'端加一个poly(C),利用3’端的poly(A)和5’
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- 求助Northern blot电泳
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是这样的，我在做Northern blot电泳之后，用0.5 ug/mlEB泡染5min，ddH2O中泡1小时，2小时观察条带，都是拖尾，包括RNA Marker也是。 我的样品处理是，甲酰胺，甲醛，RNA，10*Mops，DEPC H2O，共20ul，PCR仪中65℃ 15min，4℃ hold。拿出置于冰上
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- 请教用流式测线粒体膜电位的数据怎么处理啊？
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我是用jc-1，标记的，biyuntuan的试剂盒做的。做成像cd11b的那种位移图吗？我试着做成像凋亡那种象限图，发现没变化，但是我计算了多聚体和单聚体的比值是有变化的。
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- PCR出现下面的拖带的原因是为什么？
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PCR出现下面的拖带的原因是为什么？
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- 如何用IDT预测DNA二级结构
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1.IDT unafold会让我填一系列参数（温度、Na浓度、Mg浓度、Max foldings等），可以直接用默认值吗，还是说这个有什么讲究？2.对于同一段序列，软件会给出好几种二级结构，其△S、△H、△G不一样，这些参数是什么意思，该如何选择
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- 全血解冻后血红蛋白如何变化？
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最近在做糖化血红蛋白的测试条，对于血液样本的保存有一定的疑惑。血液在-20摄氏度冷冻，解冻后（4度或者室温解冻）发生溶血（变黑），测定糖化值和原来相比较极低。4摄氏度保存血液，预计有效期也就在2周不到。所以有
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- 同一块胶PCR做出来的既有拖尾也有暗条带，这是怎么回事？
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同一块胶PCR做出来的既有拖尾也有暗条带，这是怎么回事？急求高手指点，谢谢
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- 质粒构建，蛋白没有表达，什么原因？
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最近遇到一个问题，困扰我一个礼拜了还是没解决啊。把来自荧光假单胞菌的基因克隆到ptrc99a质粒，然后转到DH5α进行表达，iptg诱导 0.1m诱导24h 0.5mM诱导24h,SDS-PAGE凝胶是看不出来，明显表达，测试酶活也没有 。连接的测序结果是
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- 大提质粒多出一条带是怎么回事
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自配试剂大提质粒 新转化的大肠杆菌 比之前的质粒对照多出来一条第二条带下面的一条 想知道是为什么 怎么把那条带去除？
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- 测序结果求教
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用载体构建质粒导入大肠杆菌，挑克隆摇菌后提质粒送去测序，结果发现同一个基因两个测序结果不一样，一个确实一个碱基，一个多了一个碱基，请问原因是什么啊，谢谢大神
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- 【求助】real-time RT-PCR数据处理问题
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请教各位大侠，采用2- Δ Δ Ct法计算mRNA表达量的时候，每个样本的目的基因通过内参校正之后，得到Δ Ct。组内平均得到平均值±标准差。组间比较的时候，只能是干预组的Δ Ct平均值减去对照组的Δ Ct平均值吧？如果是这样的话，
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- 求问miRNA与miRNA之间存在相互作用吗？
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1.在网上查找的信息以及论文来看只有miRNA与蛋白质，lncRNA，mrna的相互作用并没有miRNA之间的相互作用。2.构建共表达网络要计算基因之间的相似性对吗？那可以构建miRNA-miRNA的共表达网络吗？
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- MDSC增殖实验求助
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各位大佬们好，本人刚开始做MDSC，有好多概念不是很理解。老板让我做MDSC的增殖实验。但是喔找个好多文献都没有关于MDSC的增殖实验说法，只有MDSC扩增后频数改变流式等方式检测。我就想问问MDSC可以用CFSE做增殖实验吗？有相
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- 求教：关于剂量依赖性的问题
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本人最近在做剂量依赖性实验，是将质粒转染到细胞中，分别设有vector GFP 未处理组以及目的质粒这四组，vector GFP组分别转染300ng，目的质粒组依次是300 250 200 150 100 50，请问是不是要保持所有组分总的质粒量一致，即300ng 是不是
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- 求助！精子RNA提取问题
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我最近提精子RNA浓度可以但 A260/A280比值一直上不去，一般在1.5-1.65之间，这是什么问题，求各位大师指导?操作步骤如下：1、将冷冻精子从液氮罐中迅速取出后，在37 °C水浴锅上30S内解冻到1.5mL无RNA酶的离心管中（样品量160ul），
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- 已知mRNA，如何推算其所有的circRNA?（中间没有miRNA的数
- 广东省广州市
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临床实验做的患者全血circRNA及mRNA的基因芯片。（没有测miRNA）目前发现circRNA有几百个有显著统计学差异，mRNA有几百个有显著差异。如何将circRNA与mRNA串起来，把故事说圆是目前的困境。circRNA除了对miRNA的海绵吸附作用，应该还有
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- 杂交捕获技术是原位杂交吗
- 广东省汕头市南澳县
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想问一下杂交捕获技术检测HPV是采用的原位杂交技术吗？如果不是杂交捕获技术检测HPV与原位杂交HPV有何区别？谢谢？
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- RT-PCR问题求助
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最近在做miRNA的RT-PCR。跑pcr是，两组明明是同一个cDNA稀释出来的，但用2-△△Ct法算出来后，结果却不是1:1，跑了好多次了，一直不知道哪儿原因，望大神们指教
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- 质粒提取求助
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本人实验小白一枚，最近用含50ug/ml卡那霉素的270mlLB培养基摇菌16个小时，菌液浑浊，用全式金试剂盒大提质粒，离完心离心管里的菌团也是很多的，为什么最用只用200 ul的试剂盒里的洗脱液EB(加热到60度）洗脱，得到的质粒浓度
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- 实时荧光定量pcr求助
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我的实验组总是会先增长后降低，请问这是为什么呀！！！求高手解答，我用的是Eva green染料
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