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  • 要求目的启动子片段2000bp左右,扩增后凝胶电泳检测,用DNAmark2000,条带均在最下面,但是扩增不出来是什么原因?另外,启动子最多有2000bp吗?我问一个老师,说不可能有2000,最多200左右。已经做了很多次实验,排除了很多失
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  • 请问下如何查找某一组织(如心脏、大脑、肾脏等)表达的所有基因?
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  • 向各位高手请教,我在用荧光定量验证lncRNA的变化。跑出的CT值,B—action还比较正常,都是15.16左右,但是实验组的CT值一般都在25到31之间,我看了有资料说CT值最好在15到25之间。请有经验的大佬们,谈一下你们的见解!如果说引
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  • 多肽合成时候,用到的氨基酸经N-Fmoc-amido-dPEG4 acid和levulinic acid耦合是什么作用呢?文献的原话:All amino acids, N-Fmoc-amido-dPEG4 acid and levulinic acid (Lev) were coupled with coupling reagents atroom temperature for 45 min each.
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  • 各位高手好,小弟做SNP位点功能效应检测,位点位于内含子区域。质粒转染适不适合用双荧光素酶检测报告基因,如果可行,做之前是否需要用qPCR测试下基因的表达情况,如果需要,麻烦指点一下咋做,谢谢!
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  • 如题,有哪位大侠知道WPRE的序列?最近实验要WPRE和polyA的效果是一样的吗?有了WPRE是否就不需要polyA了?
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  • 我克隆一个基因,3'出现了POLY A结构,但是不确定是不是,如何确定POLY A 前面的加A信号或者说怎么验证我克隆得到的就是PolyA???
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  • ELISA法检测
  • 上海市黄浦区半淞园路街道
  • 10.00
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  • 最近需要做用ELISA法检测巨噬细胞分泌的IL-6,IL-10,不清楚文献上说的细胞上清液指的是什么,怎么提取细胞上清液呢,哪位大神能指点迷津一下,感激不尽。
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  • miRNA实验求助
  • 上海市黄浦区半淞园路街道
  • 10.00
  • 诚意金悬赏
  • 437人参与 | 2人投稿
  •   已结束
  • 1.miRNA是非编码RNA,(我觉得不能翻译,就是不能表达出蛋白质呀)看文献时发现可以通过免疫印迹测它的表达量,对此有疑惑2.miRNA通过与靶标mRNA结合抑制它的翻译,正常细胞和癌细胞都是抑制作用,有什么不同呢,是不是抑制能
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  • 稀释反应后糖化血红蛋白放置时间应该是多少呢?有工程师说是20分钟。如果结果偏低的话半个小时后。但实际工作中对比。从早上放到到下午三个小时。 值更高 但说明书里没有说,具体放置段时间,那应该是以完全反应为。标
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  • 新人一枚,利用茎环反转录mirna—pcr凝胶电泳(3%,80v电压)测试是否能扩增出目的条带。然而用普通的反转录与pcr条件,扩出来的非特异性条带很多,可是确没有50bp的目的条带。按照茎环反转录原理,cDNA已经可以算是特异性cDNA了
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  • 我们之前有个腺病毒载体的干扰质粒,36000bp,说是太大了根本没可能转进细胞,细胞是小鼠脑神经瘤细胞N2A。现在想换一个载体,重新将目的序列拼接上去,问了几家公司,有说慢病毒载体的质粒转染效率高,质粒大小大概8000b
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  • 多重PCR的酶是否保真性一般?我需要扩增一个5重1.5kbp的反应,希望能保证目的片段被扩增,同时具有较好的保真性。不知道有没有好的建议?之前一直用的Qiagen Multiplex PCR kit,它完全是预混液,扩增能力很强,但不知道保真性如
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  • 最近提取脐静脉内皮细胞(HUVEC),刚做了两次,第一次脐带两端先结扎再剪断,脐静脉内血液保留着,1小时后开始提取脐静脉内皮细胞时才挤出脐静脉内的血液(已凝结);第二次,脐带未结扎,挤出并清洗脐带血管内血液后
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  • pcr实验求助
  • 上海市金山区亭林镇
  • 10.00
  • 诚意金悬赏
  • 466人参与 | 3人投稿
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  • 最近老师给了两条基因的CDs序列让我克隆全长,我先设计引物验证这段序列的准确性,设计了多对引物进行均增,其中靠近5'端的一直没有结果,又设计了5对引物,长片段短片段的都设计了,还是没有结果。但是其他位置的片段
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  • 用生信人下载的RNA-seq-HTseq-FPKM-UQ、RNA-seq-HTseq-FPKM是已经用count标准化后的值吧?这个值可以直接用于生存曲线的绘制吗?还是必须经过其他的转化?谢谢啦!
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  • miRNA引物设计
  • 上海市黄浦区半淞园路街道
  • 12.00
  • 诚意金悬赏
  • 337人参与 | 2人投稿
  •   已结束
  • 最近在做miRNA的PCR,采用加尾法检测miR-661的表达情况,已经更换两次引物,但特异性一直不好,每次实验溶解曲线会出2-3个峰。目前已排除样本及下游通用引物问题,求助大神帮忙设计一个上游引物,谢谢了。在mirbase数据库中查
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  • 图1图2图3图1 所示内容为DNA电泳图,从左往右一次为:1-4为样品,5为加了DNA酶的阳性对照,6为不加DNA酶的阴性对照,最后一个为DNA maker。问题:1、为什么阳性对照没条带;2、所有条带是不是没跑开啊。3、室温30度,是不是温度
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  • ​WB条带问题求jiu
  • 上海市徐汇区凌云路街道
  • 10.00
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  • 789人参与 | 3人投稿
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  • WB条带一直做不出来趋势,做了两个多月了,摸条件倒是挺快就出来了,但是条带一直做不出想要的趋势,我是四个不同的处理组,用四个不同剂量处理,但几个蛋白做出来四个组条带都差不多,用内参矫正后表达也都差不多,完
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  • 跑的230bp的条带,配8%的胶,加sscp变性缓冲液,在120v下一小时。指示剂就跑出头了。看了很多方法,基本都要10个小时,现在不知道问题出在了哪里,望大家来指点一下!
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显示 1~20 项 共 36 个需求
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