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  • 求威客大神帮忙分析这个基因型F– mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC) φ80dlacZΔM15 ΔlacX74 recA1 endA1 araD139 Δ(ara, leu)7697 galU galK λ– rpsL nupG tonA ΔpcnB dhfr.
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  • CRISPR技术问题
  • 广东省广州市萝岗区
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  • CRISPR技术中,先要合成ssOND,和sgRNA,我不知道它们之间的关系是什么。怎么得到?求解答
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  • 最近一直在做载体构建,手里是实验室师姐之前构建好的载体ptx8048-ORF2-CWA,宿主菌为乳酸菌,现在我要把这个ORF2(1071)截短为(798),重新连上去, 设计了一对引物,进行亚克隆,PCR后条带很亮位置正确,胶回收后鉴定,目的
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  • 求助RT-PCR反转录
  • 广东省广州市越秀区
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  • RT-PCR反转录过程中,用到的Oligo(dT)及Random Primer,有哪位大神知道序列么?Oligo(dT)是16或18个T的连续序列么?Random Primer我查了下,说是6个碱基的随机序列,结果时候4的6次方的混合?
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  • 求教老司机大神,急急急,菜鸟一枚,引物设计问题:1、在NCBI查找mRNA序列后,有好多转录本该怎么选择啊?2、在CDS序列选择时,可以选择部分序列复制到primer5.0上设计引物吗?3、引物设计可以不加保护碱基吧4、如果可以帮忙
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  • 各位大神,帮帮忙,小弟新人,最近做min6细胞系的病毒传染然后,WB现在出现的问题1.10.18号6well plate 种好了昨日10.20号发现某盘细胞中心有少许脱落。今日10.21,病毒传染之前观察细胞,量不错,但是相对较小,并且不同程度的出
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  • PCR问题求指教
  • 江苏省南京市下关区
  • 10.00
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  • 各位大神好,引物摸条件做了梯度PCR,但我的PCR是用的一条引物扩增,之后跑琼脂糖凝胶结果如图,谁能给解释一下怎么是这样的吗?万分感谢!
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  • 手上有一批斑马鱼仔鱼的原位杂交样本,想用体视显微镜(解剖显微镜)进行拍照。
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  • 最近得到一个pko3-km质粒的菌液,提取出来后侧浓度有200-300ng/ul,但是跑琼脂糖却没有任何条带,提了好几次都这样,以前提其他质粒都没出现这种情况。有知道是怎么回事的吗,想送去测序看看,但不知道pko3-km的序列和通用引物
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  • 各位大神好,小弟有五个样本,测IL17。结果中IL17的5条溶解曲线还行,可是内参的5条溶解曲线中有两条呈双峰,这是什么原因啊?下图中蓝色的是IL17的溶解曲线,红色的是内参的
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  • 大家好,我想请教下下面这段短话中所说的,为什么会存在 rolling circle amplification,不太懂原理,谢谢大家帮忙解惑!Reliable quantitation of circRNA species is made difficult by the known strand-displacementactivity of reverse transc riptases,which could result
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  • 各位威客大神好,小弟在做MCF-7划痕实验,细胞长满六孔板再划痕后用不加血清,1%或2%血清,还有1%BSA都试过了,刚划完好好的,24h后会有细胞飘起来,48h后飘起来的更多,而且不加药也看不到明显的愈合,是什么原因?单纯一个
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  • 我需要提取人血单个核细胞,看试剂公司有专门的人全血单个核细胞分离液。但是很疑惑,文献里提到的血液单个核细胞的分离都是用的淋巴细胞分离液,大神们可以帮忙解开这个疑惑不?
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  • 请教各位,组织提好rna,260/280在1.8-2.0之间,浓度尚可,逆转录用2ug,20ul体系,qPCR后内参GAPDH的CT值一直在28左右,中间多次调整cDNA的浓度和量,也试过不稀释cDNA直接加2ul,20ul体系,可CT值还是变化不大,请问就是RNA存在降解的
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  • 各位大神,求指导,GENEBANK里的CDS是去除内含子的DNA序列吗?例如cds是AAGTGTTGT-----------TCATGCTTGG,作为5端到3端,,,是否就可以看成他的mRNA就是UUCACAACA--------AGUACGAACC,作为3端到5端,那么起始密码子AUG就是红色显示的?
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  • 如何查lncRNA上可能的microRNA结合位点的软件或网站(ceRNA调控机制)?求大神指点下一二!
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  • 我是一个新手,最近在做分子克隆。做到转化这一步,已经做过四五遍了,但是无论是在有氨苄的平板上还是没氨苄的平板上都不长菌。氨苄的最终浓度试过50ug/ml和100ug/ml的。现在也不清楚哪里出错了,操作步骤都严格按照说明
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  • 本人近期做qPCR实验,但是结果发现GAPDH的Ct值在25左右,目的基因的Ct值在32左右,这样的结果是不是进行下一步的分析不可信?在细胞中做的一般看家基因的Ct值在18左右。各位有遇到过类似的情况吗?出现这种情况的原因是什么
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  • 求指导如何查找跟一个基因某个SNP位点的连锁的位点,之前用haploview筛查过,但是没有这个位点的信息。原基因是ADRA2A rs13306146,找它的连锁的位点。
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  • PCR问题,求指导
  • 北京市东城区东华门街道
  • 10.00
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  • 863人参与 | 4人投稿
  •   已结束
  • 20ul的体系加5ul的模板目的条带是阴性的,改换20ul体系加3ul的模板目的条带是阳性的,这是因为什么原因?
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