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  • 我请公司合成了siRNA片段进行干扰,WB显示靶蛋白都被下调甚至没有,但是干扰片段导致的增殖效应差异很大,有的片段显著抑制了细胞增殖,有的片段没有效果甚至促进了增殖,我很困惑,不知道应该如何下结论。可否请教一下
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  • RT-PCR问题求助
  • 广东省广州市越秀区
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  • 最近在做miRNA的RT-PCR。跑pcr是,两组明明是同一个cDNA稀释出来的,但用2-△△Ct法算出来后,结果却不是1:1,跑了好多次了,一直不知道哪儿原因,望大神们指教
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  • 质粒提取求助
  • 广东省广州市越秀区
  • 10.00
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  • 本人实验小白一枚,最近用含50ug/ml卡那霉素的270mlLB培养基摇菌16个小时,菌液浑浊,用全式金试剂盒大提质粒,离完心离心管里的菌团也是很多的,为什么最用只用200 ul的试剂盒里的洗脱液EB(加热到60度)洗脱,得到的质粒浓度
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  • 我的实验组总是会先增长后降低,请问这是为什么呀!!!求高手解答,我用的是Eva green染料
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  • 各位前辈们,新手最近开始养细胞,我养的是HK-2细胞,新复苏的细胞传了一两代后发现明显看到部分细胞黑点增多,并且这些细胞变小,明显聚集成团状,区别于正常形态的细胞,观察到这些黑点并无运动的情况。起先怀疑是支
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  • 荧光pcr问题求助
  • 黑龙江省哈尔滨市五常市
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  • 如果想看癌组织与正常组织的表达量我是应该直接看2-(△CT癌-△CT正常)?还是用2-△CT癌和2-△CT正常进行配对t?如果想看表达量与年龄,性别,淋巴结转移的关系是用2-(△CT癌-△CT正常)还是2-△CT癌?
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  • qpcr求助
  • 湖南省长沙市天心区
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  • 我想做课题circRNA调控miRNA/HIF-1α轴对心肌梗死的影响,现已经查到miR-199a-5p/HIF-1α互作,却不会使用预测网站去查询miR-199a-5p的上游circRNA。请技术专家为我查询miR-199a-5p的上游circRNA,并告知我查询过程和结果,必要时请配插图。
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  • 做RT-PCR,让TAKARA合成的引物,需要做预实验吗?可以直接上样品做吗?逆转录的cDNA需要分装保存吗?
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  • 向各位高手请教,我在用荧光定量验证lncRNA的变化。跑出的CT值,B—action还比较正常,都是15.16左右,但是实验组的CT值一般都在25到31之间,我看了有资料说CT值最好在15到25之间。请有经验的大佬们,谈一下你们的见解!如果说引
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  • 请问miranda,miRDB预测结果怎么能下载下来呢,下载下来后怎么能取交集呢,新手,刚开始学,实在是找不着方法,请指点
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  • 六孔板种板细胞,Trizol提取星形胶质细胞的总RNA,几次得到的浓度、纯度都很低,甚至有时加异丙醇离心后见不到沉淀,请问有什么方法可以改进,有哪些细节需要注意?
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  • 连接前,酶切结果还是1kb-1.5kb连接后的重组子,做酶切鉴定,目的片段变成了2.5kb左右(左1,左2),而且比质粒片段的亮度弱很多(质粒片段大小合适,约5000bp)想不通,是酶切后胶回收出了问题,还是连接过程出了问题,还是
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  • 外泌体鉴定
  • 北京市东城区东华门街道
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  • 今年开始接触血浆外泌体,现在正想要做外泌体电镜,不知是否有靠谱的公司推荐呢?另外,我用的是qiagen试剂盒77064,现在鉴定是否也要用这个试剂盒提外泌体送鉴定才行?还是可以不一致,选择超速离心?请前辈指导,谢谢!
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  • 有没有做过成年鼠原代星形胶质细胞培养的小伙伴呢?我取的是海马组织,剪碎之后 加胰酶消化30min 1000转离心15min 弃上清 加入培养基(DMEM/F12 10%FBS 2%B27 1%PS)接种到已孵育过PLL的培养瓶中,看不到细胞贴壁想求教有做过成年鼠原
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  • 第一张图是上午我做pcr扩增 第一个是marker 我的目的基因94bp 前四个是目的基因 后四个是内参基因 目的基因条带暗 marker也没第二张图是下午扩增的 第一个是marker 前六个是目的 后面几个是内参 但我的目的基因条带感觉都有点暗
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  • qpcr的问题
  • 广西南宁市上林县
  • 10.00
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  • 最近做了几次qPCR,得到的曲线还可以,但是C值变化很大,有时候是对照组高,有时候是实验组高,为什么呢?做的三次PCR用的不同公司的药品,是因为这个吗?
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  • 目前在做定点突变,PCR产物浓度挺高的,条带也是正确的,但是就是单克隆生长较少甚至没有。模板链直接转化是有单克隆生长的,考虑是不是由于定点突变产物是线性的?如果把线性产物环化,转化效率会不会高一些?
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  • 用TRIZOL法提细胞RNA,其他细胞都ok,有一个细胞提好多次(做了不同细胞量的对比),反转录PCR,GAPDH都批不出来,求大神把脉。
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显示 81~100 项 共 360 个需求
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