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  • 质粒转染问题
  • 广东省广州市海珠区
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  • 质粒带有GFP标签,总共三个,0组个为带GFP标签的空载体,1组、、2组为带GFP标签的目的基因质粒,转染HEK293总共转染四次。第一次用lipo2000,按照说明书转的,荧光显微镜下观察,三组均木有荧光。第二次用LIPO3000,荧光显微镜下观
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  • 扩的是5kb的长片段,因为测序一个反应测600bp,要测通需要中间设计引物,请问哪位朋友知道什么测序引物设计软件之类的,或者测序跟PCR引物的设计规则一样吗?
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  • 要在IGG1抗体重链上突变一个F405L ,但是这部分区域用PRIMER5找不到非特异性结合很少且3’端非特异性结合△G很小的,最合适的也有-11.多,尝试了一组引物 得不到目标突变产物。 想用OVERLAP PCR来做突变,一条引物3端△G也有-12.8,
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  • 某个癌基因在乳腺癌细胞中,做pcr是高表达的,但是做wb却是低表达。求各位大神帮忙分析分析,这是什么原因呢?
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  • 这些框框里的基因好像从来没见过啊,查也查不到,这些都是什么基因啊?
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  • 我是利用130bp的DNA双链模板,合成sgrna,每次合成的sgrna在3%的琼脂糖电泳里,目的条带应该是模板大小的一半,大约60bp左右,但是在100bp的位置上一直都有很亮的条带!不知道大家有没有遇到相似的问题,我起初怀疑是DNA和RNA结合
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  • 我想请教一个问题。我之前做的qPCR内参在20-22,目的基因最大的一个在27-29。现在的问题是,我的cDNA还要做几个别的基因,量太少不够用了。我把cDNA又稀释了4倍试了一下,内参在23-24,这样的内参值可以接受吗?我可以按这个比
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  • 过表达质粒转染细胞,以空载质粒做对照,48h后检测对凋亡的影响。请问定象限的时候是用空载质粒的对照组,还是需要用未转染的正常细胞?
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  • 经常要表达细菌或真核生物的蛋白,细菌的一般不要求活性,主要是用于做免疫原,真核生物的一般要求要有活性,但是经常面对选择表达载体的时候犯愁,pet32a和pGEX-4T-1作为最常用的表达载体,究竟该选哪一个,那个比较适合
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  • PD1免疫组化
  • 江苏省南京市下关区
  • 10.00
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  • 大家好,目前是在做PD1免疫组化,抗体是abcam公司的,标本是头颈肿瘤,大部分都是鳞癌(石蜡切片),结果总是封片后肌细胞胞浆出现淡淡黄色(非特异性染色)。我查了PD1主要是癌旁的活化T细胞表达。不知道是什么原因,向
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  • 骨头提取RNA问题
  • 湖南省长沙市天心区
  • 10.00
  • 诚意金悬赏
  • 564人参与 | 1人投稿
  •   已结束
  • 大家好,第一次做骨头的DNA提取,请问是怎么提取,感觉液氮不好磨呀。求救
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  • 最近提取脐静脉内皮细胞(HUVEC),刚做了两次,第一次脐带两端先结扎再剪断,脐静脉内血液保留着,1小时后开始提取脐静脉内皮细胞时才挤出脐静脉内的血液(已凝结);第二次,脐带未结扎,挤出并清洗脐带血管内血液后
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  • 检测血小板miRNA
  • 广东省广州市萝岗区
  • 10.00
  • 诚意金悬赏
  • 436人参与 | 1人投稿
  •   已结束
  • 我想检测血小板miRNA,准备从全血中分离出血小板出来,然后用qtpcr检测,请问用什么抗凝管,需要多少毫升的血小板?
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  • 求高手解释下,最近做了一个lncRNA基因的荧光PCR,发现目的基因的Ct值比内参基因小,也就是目的基因的表达量比内参基因高,请问怎么回事啊,一般情况下,应该是内参基因的表达量比较高才是啊!
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  • 请问一下~物质A可能通过使B分子表达下调,从而使C蛋白表达上调。如果要证明B分子确实是调控作用,那么在试验中应该对B分子进行基因过表达还是基因沉默好呢?
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  • 巨噬细胞吞噬
  • 广东省广州市越秀区
  • 10.00
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  • 410人参与 | 1人投稿
  •   已结束
  • 这是巨噬细胞吞噬实验的结果图片。请问,这个网状结构是什么?这些为染色的细胞是什么细胞?
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  • 大家好, 最近我在做GRA7基因,连接T载体后已测序,目的基因正确插入,现准备酶切后连接表达载体,用BamH1和Sal1酶切,因为目的基因中有两个sal1酶切位点,所以部分酶切,BamH1 37度过夜,Sal1切60分钟,可是条带很弱,试过10*H B
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  • 最近做的是lncrna,用sirna干扰72小时之后,做cck8,sirna组和未干扰组测得数据无区别,也不知道哪出问题,请哪位大神指点一下,谢谢
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  • pcr实验求助
  • 上海市金山区亭林镇
  • 10.00
  • 诚意金悬赏
  • 528人参与 | 3人投稿
  •   已结束
  • 最近老师给了两条基因的CDs序列让我克隆全长,我先设计引物验证这段序列的准确性,设计了多对引物进行均增,其中靠近5'端的一直没有结果,又设计了5对引物,长片段短片段的都设计了,还是没有结果。但是其他位置的片段
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  • 开始接触real-time pcr,在求△△CT有点疑问,希望各位老师多多指教,谢谢~实验有五个分组,正常组、造模组、低剂量组、中剂量组、高剂量组、UDCA组,每组有9个检验结果,在算出△CT后,△△CT应该怎么求,对照组求平均数再减
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显示 141~160 项 共 342 个需求
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