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  • 分别提取细胞质与细胞核RNA 来检测lncRNA在细胞内的定位,但是目前并不知道该如何去做,请问是否各位大神有提取细胞核与细胞质的protocol???将各组分分离之后加TRIZOL是否就可以提取RNA了??哪位大神做过这个实验可否指点
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  • 将目的基因分别克隆入pEGFP-C3和pSC66质粒。克隆入pEGFP-C3的后期要做流式细胞,克隆入pSC66的后期要做免疫沉淀和免疫荧光,希望各位不吝赐教,或者有相关的资料可以以百度网盘方式分享给我一下,谢谢
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  • 细胞吞噬
  • 湖北省武汉市东西湖区
  • 10.00
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  • 590人参与 | 2人投稿
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  • 小弟在最近树突状细胞的吞噬功能流式检测遇到了一些问题,亟待向各位请教,我做了成熟和未成熟的DCs吞噬,分别37℃,30min、60min、90min和4℃,但是吞噬率都仅有10%-20%,延长时间和加多FITC-Dextran对吞噬率也几乎没有影响,想不
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  • 有一个基因的两个小片段,现在想通过搭桥扩增的方法得到一个完整的大片段,两个小片段是经过纯化回收的,就是PCR体系一直找不到最适条件,请大神们指教~谢谢
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  • 载体构建求助
  • 广东省广州市海珠区
  • 10.00
  • 诚意金悬赏
  • 789人参与 | 3人投稿
  •   已结束
  • 载体有克隆载体和表达载体之分,表达载体是在克隆载体的基础上增加了表达原件吗?那么为什么不直接用表达载体就可以了。我看到有些信息上写表达载体没有酶切位点,那么表达载体不是在克隆载体的基础上构建的吗?为什
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  • 我的研究目的是:药物对不同突变型的诱导作用是否存在差异。 突变位点在编码区,但是这个药物的结合位点在启动子区的一段顺式作用元件上,现在公司说不能将这个元件和编码区一起构建,求大神指教我应该怎么做呢?
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  • ​WB条带问题求jiu
  • 上海市徐汇区凌云路街道
  • 10.00
  • 诚意金悬赏
  • 756人参与 | 3人投稿
  •   已结束
  • WB条带一直做不出来趋势,做了两个多月了,摸条件倒是挺快就出来了,但是条带一直做不出想要的趋势,我是四个不同的处理组,用四个不同剂量处理,但几个蛋白做出来四个组条带都差不多,用内参矫正后表达也都差不多,完
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  • 如果一个基因在Ensemble搜索显示是lincrna那肯定是lincrna,但是如果这个基因搜索显示是antisense或者是sense intronic,那么这个基因算不算lncrna
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  • 各位大神们,我要把atctctcctcttcctcctggaagccacaaga突变成atctctcatcttactcctaaaagccacaaga,该怎么设计突变引物!万分感谢!
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  • 背景:移植肾患者8年后出现肾肿物,活检前后两次病理不同:1.肾细胞癌 2.尿路上皮癌提问:1.请问人体内不同类型肿瘤基因是否不同?2.如不同,可否通过基因测序方法检测证明该肿物来源?请提供肾细胞癌和尿路上皮癌的基因
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  • lncRNA的引物设计
  • 广西南宁市上林县
  • 10.00
  • 诚意金悬赏
  • 559人参与 | 4人投稿
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  • 都说lncRNA的引物设计和mRNA一样,那可不可以像mRNA引物设计一样,让lncRNA的引物也跨内含子(如果这个lncRNA有几个外显子的话),这样就解决了样品RNA中DNA污染的问题了。如果可以,如何设计?好像primer Blast不能识别lncRNA中的外显
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  • 请教高手,本人有一段未知的miRNA,现在成熟序列已验证完毕,想预测其靶点,但不知道怎样预测。据我了解,现在大多数软件都是针对已知的miRNA进行预测,不知道这种未知miRNA有没有专门的预测软件,或者通过什么算法进行预
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  • 跑的230bp的条带,配8%的胶,加sscp变性缓冲液,在120v下一小时。指示剂就跑出头了。看了很多方法,基本都要10个小时,现在不知道问题出在了哪里,望大家来指点一下!
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  • 在做CRISPR/Cas9基因敲除实验,现在挑选完了单克隆细胞,之后马上要检测打靶效率。就是PCR敲除位点附近序列,在靶位点前后合适位置设计检测引物。小弟就是这一步骤不太明白,怎么设计这个引物。1,是突变的和野生的分别设
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  • 海肾的值和萤火虫几乎都是平行的,最后一组还更高!而且我萤火虫的值也都是偏低的,这是为什么啊…………质粒转染目的载体:tk载体=10:1。42小时后收细胞做检测。7404长开快全部铺满了,huh7密度还好但形态改变很多。是转染
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  • 如图,转录出来的RNA就是以3'-5'端的DNA为模板的,那我能直接合成单链的3'-5'端的DNA来用T7RNA聚合酶转录吗?菜鸟求高手解惑,十分感谢!
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  • 求助,体外转录得到的RNA你们都怎么提纯的呀!我用的酚氯仿提纯不知道是不是操作太慢还是中间有污染,虽然用测浓度还可以但好像已经降解了,提纯怎么操作比较安全不易降解!求助求助!
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  • 如图1这组数据中,第一列是控制组,第二列是干旱处理1小时,第三组是干旱处理6小时,数据都经过log2(TPM+1)如图2这里的上调,是说必须得到的值大于5才是上调表达,还是说,只要实验组数据/控制组数据大于2就可以认为是上调
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  • 给位大神好,我们现做表征遗传病的非编码RNA的测序分析。因为对照组组织不能从正常人取材,所以只能采血做表达谱的分析。现在有这样的问题:我们打算做miRAN,lncRNA,mRNA的差异表达分析。通过查阅文献,除了组织外,都是做的
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