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  • 大家好, 最近我在做GRA7基因,连接T载体后已测序,目的基因正确插入,现准备酶切后连接表达载体,用BamH1和Sal1酶切,因为目的基因中有两个sal1酶切位点,所以部分酶切,BamH1 37度过夜,Sal1切60分钟,可是条带很弱,试过10*H B
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  • cck8检测细胞增殖
  • 四川省成都市双流县
  • 10.00
  • 诚意金悬赏
  • 99人参与 | 1人投稿
  •   12天后投稿截止
  • 最近做的是lncrna,用sirna干扰72小时之后,做cck8,sirna组和未干扰组测得数据无区别,也不知道哪出问题,请哪位大神指点一下,谢谢
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  • pcr实验求助
  • 上海市金山区亭林镇
  • 10.00
  • 诚意金悬赏
  • 115人参与 | 3人投稿
  •   9天后投稿截止
  • 最近老师给了两条基因的CDs序列让我克隆全长,我先设计引物验证这段序列的准确性,设计了多对引物进行均增,其中靠近5'端的一直没有结果,又设计了5对引物,长片段短片段的都设计了,还是没有结果。但是其他位置的片段
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  • 开始接触real-time pcr,在求△△CT有点疑问,希望各位老师多多指教,谢谢~实验有五个分组,正常组、造模组、低剂量组、中剂量组、高剂量组、UDCA组,每组有9个检验结果,在算出△CT后,△△CT应该怎么求,对照组求平均数再减
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  • 最近在开发一个针对人源抗原的双抗夹心ELISA方法,抗体是通过别的公司制作的小鼠免疫的单克隆抗体。在做一个专属性考察的时候,想看看筛选的抗体是不是只对人源的有特异性,于是就加入了一个鼠源的抗原作为对照。结果在
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  • 求助PCR引物设计
  • 吉林省长春市九台市
  • 15.00
  • 诚意金悬赏
  • 148人参与 | 2人投稿
  •   7天后投稿截止
  • 我最近要扩一个基因后期做原核表达,但是我的引物的GC含量上不去,就一直在百分之二十一左右,往后加碱基GC含量变得越低了,这个怎么办?序列是一个开放阅读框,求大神支招,很急
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  • 上图为我质粒酶切验证后DNA跑胶的图片,上样顺序为:Marker 空载质粒(未酶切) 其余为带有目的片段的质粒(酶切后)。质粒为双酶切质粒(EcoR I Nde I)。用的酶为Takara 的Q-cut系列的酶。总是出现挑出来的菌做小提酶切验证后
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  • pcr技术问题
  • 广东省广州市萝岗区
  • 10.00
  • 诚意金悬赏
  • 224人参与 | 3人投稿
  •   4天后投稿截止
  • 我设计了六个DNA片段的引物,结果只有两个有条带,对另外四个我又重新做了一次实验,结果还是没有条带,请问可能的原因有哪些!
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  • PCR引物问题求助
  • 山东省济南市历下区
  • 12.00
  • 诚意金悬赏
  • 198人参与 | 3人投稿
  •   3天后选稿结束
  • 1.本人最近用权威文献中的引物PCR,使用前在NCBI上BLAST 了一下,可是并没有结果。这个引物可用吗?2.自己用OLIGO7 设计了一对引物,评分良好,BLAST 特异性好。可是实际一直P出某条非目的条带。退火温度也按TM值调节过了。实在
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  • 目前有什么办法可以预测或检验某个蛋白质启动子区与某个lncRNA的结合位点?
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  • pcr扩细胞裂解液的gDNA,只有刚裂解马上做pcr,才有条带,把细胞裂解液在-20℃放置过夜后第二天扩或者仅仅是隔几个小时扩,条带就会特别弱甚至没有条带,这是为什么?冬天扩gDNA还没有出现这种情况,基本上第一次摸好条件了
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  • 用生信人下载的RNA-seq-HTseq-FPKM-UQ、RNA-seq-HTseq-FPKM是已经用count标准化后的值吧?这个值可以直接用于生存曲线的绘制吗?还是必须经过其他的转化?谢谢啦!
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  • miRNA引物设计
  • 上海市黄浦区半淞园路街道
  • 12.00
  • 诚意金悬赏
  • 121人参与 | 2人投稿
  •   已结束
  • 最近在做miRNA的PCR,采用加尾法检测miR-661的表达情况,已经更换两次引物,但特异性一直不好,每次实验溶解曲线会出2-3个峰。目前已排除样本及下游通用引物问题,求助大神帮忙设计一个上游引物,谢谢了。在mirbase数据库中查
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  • DNA提取求助
  • 广西南宁市上林县
  • 15.00
  • 诚意金悬赏
  • 143人参与 | 3人投稿
  •   已结束
  • 用口腔拭子提DNA很久了,但是目前的试剂盒提取方法比较繁琐,请问各位大神你们提口腔拭子DNA一般都用的什么方法?什么的试剂盒?
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  • 有几个问题一直不明白,想咨询一下大家1.骨髓来源巨噬细胞(BMDM)、血液中的单核细胞、腹腔来源巨噬细胞之间有什么区别?2.以上三种来源的都是M1、M2还是M0?3.有paper说分离外周血的单核细胞注射到小鼠体内,那么BMDM可以吗
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  • 请问小鼠动脉粥样硬化易损斑块模型如何构建?求大神指导或者给些参考资料,谢谢!
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  • qpcr知道要做标准曲线验证引物扩增效率。那么我想知道在后续正规跑的qpcr实验里究竟什么叫扩增效率低?大家认为怎样就算扩增效率低了?除了标准曲线还有其他的结果代表扩增效率吗?
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  • 我想构建人生长激素基因的质粒载体,但是文献查询都没有标注所转染的基因的GeneBank号,所以不太明白该选择合成哪个基因的CDS区。在NCBI上查询到Human growth hormone gene (HGH-N), complete cds(M13438.1),基因大小为2657bp,其对应的蛋白
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  • 第一次使用Primer6设计引物 设计的正向引物居然就是基因序列的一段 blast时显示该引物对于PCR模板并不特异 这是为什么 谢谢
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显示 1~20 项 共 186 个需求

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