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  • 双酶切空载pGEX-6p-1,37℃酶切3h,切完只有这个条带:然后做了对照,两组不加限制酶但加了10×酶切buffer,一组不加限制酶和10×酶切buffer,都是37℃酶切3h,结果如下:结果很奇怪,像是被核酸酶降解? 提质粒用的5mL DH5α菌液,提
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  • 请问大家希特林缺陷病中的SLC25A13基因基因突变c.IVS6+5G>A、c.615+5G>A怎么读出来???还有851del854是否可以读为第851位碱基的缺失突变??1638_1660dup23读为第1638位碱基的重复突变??感激不尽!!!
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  • 想从石蜡切片中提取DNA,首先第一步就是讲组织从玻片上溶解下来,想问下大家都是用什么方法的,直接用手术刀刮下来吗? 看到石蜡提取试剂盒里写着二甲苯溶解,想问下玻片用二甲苯溶了后是去除石蜡的 怎么把组织溶下来放
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  • 本来想验证lncRNA、miRNA和mRNA三者在我研究的模型里表达量的相关性,请问在反转录和扩增过程有什么不同吗?周围做实验的有人都用同一种反转录试剂盒,有人说需要用miRNA的专门的反转录试剂盒?这两者有什么区别吗?另外miRN
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  • 最近看到一篇文献,关于乙脑全长感染性克隆作者将全长分为3段分别进行扩增,通过融合pcr相互连接,再上载体但我发现片段1的上游引物与片段3的下游引物分别添加了很多碱基,想咨询大家它们是什么p1f:ATGCGGCCGC+T7启动子+乙脑
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  • 请问下如何查找某一组织(如心脏、大脑、肾脏等)表达的所有基因?
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  • 超表达载体构建
  • 天津市和平区体育馆街道
  • 10.00
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  •   4天后选稿结束
  • 求助:1超表达载体构建引物如何设计,2 目的基因的CDS序列有五千多,反转录后会不会碱基缺失或者突变,我之前用CDS序列前后数了15个碱基作为引物,之后连接T载测序发现片段中间缺失了几十个碱基,是不是我方法有问题,求
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  • 想问一下杂交捕获技术检测HPV是采用的原位杂交技术吗?如果不是杂交捕获技术检测HPV与原位杂交HPV有何区别?谢谢?
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  • 想问一下杂交捕获技术检测HPV是采用的原位杂交技术吗?如果不是杂交捕获技术检测HPV与原位杂交HPV有何区别?谢谢?
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  • 我请公司合成了siRNA片段进行干扰,WB显示靶蛋白都被下调甚至没有,但是干扰片段导致的增殖效应差异很大,有的片段显著抑制了细胞增殖,有的片段没有效果甚至促进了增殖,我很困惑,不知道应该如何下结论。可否请教一下
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  • RT-PCR问题求助
  • 广东省广州市越秀区
  • 10.00
  • 诚意金悬赏
  • 171人参与 | 1人投稿
  •   已结束
  • 最近在做miRNA的RT-PCR。跑pcr是,两组明明是同一个cDNA稀释出来的,但用2-△△Ct法算出来后,结果却不是1:1,跑了好多次了,一直不知道哪儿原因,望大神们指教
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  • 质粒提取求助
  • 广东省广州市越秀区
  • 10.00
  • 诚意金悬赏
  • 187人参与 | 3人投稿
  •   已结束
  • 本人实验小白一枚,最近用含50ug/ml卡那霉素的270mlLB培养基摇菌16个小时,菌液浑浊,用全式金试剂盒大提质粒,离完心离心管里的菌团也是很多的,为什么最用只用200 ul的试剂盒里的洗脱液EB(加热到60度)洗脱,得到的质粒浓度
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  • 我的实验组总是会先增长后降低,请问这是为什么呀!!!求高手解答,我用的是Eva green染料
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  • 各位前辈们,新手最近开始养细胞,我养的是HK-2细胞,新复苏的细胞传了一两代后发现明显看到部分细胞黑点增多,并且这些细胞变小,明显聚集成团状,区别于正常形态的细胞,观察到这些黑点并无运动的情况。起先怀疑是支
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  • 荧光pcr问题求助
  • 黑龙江省哈尔滨市五常市
  • 10.00
  • 诚意金悬赏
  • 247人参与 | 1人投稿
  •   已结束
  • 如果想看癌组织与正常组织的表达量我是应该直接看2-(△CT癌-△CT正常)?还是用2-△CT癌和2-△CT正常进行配对t?如果想看表达量与年龄,性别,淋巴结转移的关系是用2-(△CT癌-△CT正常)还是2-△CT癌?
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  • qpcr求助
  • 湖南省长沙市天心区
  • 5.00
  • 诚意金悬赏
  • 357人参与 | 2人投稿
  •   已结束
  • 我想做课题circRNA调控miRNA/HIF-1α轴对心肌梗死的影响,现已经查到miR-199a-5p/HIF-1α互作,却不会使用预测网站去查询miR-199a-5p的上游circRNA。请技术专家为我查询miR-199a-5p的上游circRNA,并告知我查询过程和结果,必要时请配插图。
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  • 做RT-PCR,让TAKARA合成的引物,需要做预实验吗?可以直接上样品做吗?逆转录的cDNA需要分装保存吗?
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  • 向各位高手请教,我在用荧光定量验证lncRNA的变化。跑出的CT值,B—action还比较正常,都是15.16左右,但是实验组的CT值一般都在25到31之间,我看了有资料说CT值最好在15到25之间。请有经验的大佬们,谈一下你们的见解!如果说引
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