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  • qpcr求助
  • 湖南省长沙市天心区
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  • 我想做课题circRNA调控miRNA/HIF-1α轴对心肌梗死的影响,现已经查到miR-199a-5p/HIF-1α互作,却不会使用预测网站去查询miR-199a-5p的上游circRNA。请技术专家为我查询miR-199a-5p的上游circRNA,并告知我查询过程和结果,必要时请配插图。
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  • 做RT-PCR,让TAKARA合成的引物,需要做预实验吗?可以直接上样品做吗?逆转录的cDNA需要分装保存吗?
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  • 向各位高手请教,我在用荧光定量验证lncRNA的变化。跑出的CT值,B—action还比较正常,都是15.16左右,但是实验组的CT值一般都在25到31之间,我看了有资料说CT值最好在15到25之间。请有经验的大佬们,谈一下你们的见解!如果说引
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  • 请问miranda,miRDB预测结果怎么能下载下来呢,下载下来后怎么能取交集呢,新手,刚开始学,实在是找不着方法,请指点
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  • 六孔板种板细胞,Trizol提取星形胶质细胞的总RNA,几次得到的浓度、纯度都很低,甚至有时加异丙醇离心后见不到沉淀,请问有什么方法可以改进,有哪些细节需要注意?
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  • 连接前,酶切结果还是1kb-1.5kb连接后的重组子,做酶切鉴定,目的片段变成了2.5kb左右(左1,左2),而且比质粒片段的亮度弱很多(质粒片段大小合适,约5000bp)想不通,是酶切后胶回收出了问题,还是连接过程出了问题,还是
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  • 外泌体鉴定
  • 北京市东城区东华门街道
  • 10.00
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  • 今年开始接触血浆外泌体,现在正想要做外泌体电镜,不知是否有靠谱的公司推荐呢?另外,我用的是qiagen试剂盒77064,现在鉴定是否也要用这个试剂盒提外泌体送鉴定才行?还是可以不一致,选择超速离心?请前辈指导,谢谢!
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  • 有没有做过成年鼠原代星形胶质细胞培养的小伙伴呢?我取的是海马组织,剪碎之后 加胰酶消化30min 1000转离心15min 弃上清 加入培养基(DMEM/F12 10%FBS 2%B27 1%PS)接种到已孵育过PLL的培养瓶中,看不到细胞贴壁想求教有做过成年鼠原
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  • 第一张图是上午我做pcr扩增 第一个是marker 我的目的基因94bp 前四个是目的基因 后四个是内参基因 目的基因条带暗 marker也没第二张图是下午扩增的 第一个是marker 前六个是目的 后面几个是内参 但我的目的基因条带感觉都有点暗
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  • qpcr的问题
  • 广西南宁市上林县
  • 10.00
  • 诚意金悬赏
  • 204人参与 | 3人投稿
  •   已结束
  • 最近做了几次qPCR,得到的曲线还可以,但是C值变化很大,有时候是对照组高,有时候是实验组高,为什么呢?做的三次PCR用的不同公司的药品,是因为这个吗?
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  • 目前在做定点突变,PCR产物浓度挺高的,条带也是正确的,但是就是单克隆生长较少甚至没有。模板链直接转化是有单克隆生长的,考虑是不是由于定点突变产物是线性的?如果把线性产物环化,转化效率会不会高一些?
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  • 用TRIZOL法提细胞RNA,其他细胞都ok,有一个细胞提好多次(做了不同细胞量的对比),反转录PCR,GAPDH都批不出来,求大神把脉。
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  • 多肽合成时候,用到的氨基酸经N-Fmoc-amido-dPEG4 acid和levulinic acid耦合是什么作用呢?文献的原话:All amino acids, N-Fmoc-amido-dPEG4 acid and levulinic acid (Lev) were coupled with coupling reagents atroom temperature for 45 min each.
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  • 用CRISPR-Cas9技术进行基因敲除,用错配酶法 (Surveyor) 检测结果显示阳性,即Cas/sgRNA结果有效。能不能不做western blot检测蛋白表达,只用错配酶法的结果就说明该基因已经被成功敲除了呢?
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  • 学习抑制性消减杂交的原理中,说产物a(单链tester cDNA)没有引物结合位点所以不能扩增。这一点不能理解,产物a的一端不是也有接头吗,为什么引物不能识别?求大神指教!
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  • 各位高手好,小弟做SNP位点功能效应检测,位点位于内含子区域。质粒转染适不适合用双荧光素酶检测报告基因,如果可行,做之前是否需要用qPCR测试下基因的表达情况,如果需要,麻烦指点一下咋做,谢谢!
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  • 最近在用同源重组的方法构建质粒,目的片段A加到载体1和载体2上,涂板后菌落PCR均检测不到目的片段。而目的片段B和目的片段C很轻松就能加到载体1。片段A已测序正确,使用试剂相同,三个目的片段加的同源臂相同,双酶切载
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  • 如题,构建某基因点突变质粒转入细胞株中研究其功能,但细胞株基因组野生型的也在那,会对功能有影响吗?换句话说,细胞株基因组野生型的基因在那,突变的质粒转进去有何用?问题可能有点傻傻的,但我还真的不懂,求
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  • 我用NCBI查了我目的基因的cDNA序列是2881个碱基,但是查出的蛋白质序列却有1124个氨基酸,两者之间并不是三倍左右的关系,请问各位高手为什么会出现这种问题呢?种属和对应的基因库编码都是一样的,也不知道为什么~正在完成
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显示 1~20 项 共 273 个需求
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