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  • 今天做悬浮细胞免疫荧光,但是细胞丢失太明显,搜了一圈版也没看到特别针对性的答案,特来求助!贴一下步骤:(都是在1.5ml EP管中进行的,轻微吹打重悬,离心后用吸引器吸去大部分上清)1. 细胞离心,取50*10^5/管,离心900r
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  • ELISA求助
  • 浙江省杭州市上城区
  • 10.00
  • 诚意金悬赏
  • 102人参与 | 3人投稿
  •   11天后投稿截止
  • 做ELISA时将标准曲线的数值代进去用excel的二次项方程拟合,y轴是OD值,x轴为浓度,得到标准曲线方程后,将我的样品的OD值代进去算得到浓度的数值不在标准曲线的对应数值之间是什么情况呀?而且经常会有负值出现?比如说标
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  • 抗体的选择问题
  • 江西省南昌市东湖区
  • 10.00
  • 诚意金悬赏
  • 146人参与 | 3人投稿
  •   20小时后选稿结束
  • 求助各位大神,最近做实验要检测大鼠来源的四种常见的蛋白:I,IV型胶原,层粘连蛋白,纤维连接蛋白,去santa官网选择抗体,发现每种抗体都有好多种,而且标注的不是针对这种蛋白,是针对这种蛋白的亚单位,如层粘连蛋白
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  • 大家好!如题,想用免疫荧光法证明NF-kB活化入核,原本的做法是 :用细胞爬片做的免疫荧光,pp65一抗孵育过夜,次日,再用荧光二抗孵育。最后,DAPI复染核。共聚焦显微镜观察pp65 与DAPI 共定位情况,若两者出现共定位情况,
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  • 做了两次支气管镜检查,三次免疫组化,三次免疫组化结果都是全阴,请帮忙分析一下,到底是那种分型呢?
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  • 第一个是actin第二个是目的蛋白电泳90V,1.5h转膜200mA,1.5h目的蛋白分子量58请老师们帮忙分析一下,哪里需要改进,多谢。
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  • ELISA问题
  • 广东省广州市越秀区
  • 10.00
  • 诚意金悬赏
  • 178人参与 | 3人投稿
  •   已结束
  • 用的是厂家的试剂盒,ELISA洗涤液,本来该是该用ddH2O1:20稀释,拿错量筒,直接1.:40稀释了。。。 求问大神有什么解决方法吗? 比如说本来洗四次,现在改成八次可以吗?
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  • 我想做巨噬细胞对结核菌杀菌作用的实验,一般是感染结核菌,用阿米卡星杀灭胞外结核,然后培养一段时间裂解细胞,对裂解液进行菌落计数。但有一个问题是如何保证在初始状态下细胞的含菌量是基本一致的呢?如果某种刺
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  • 怎么用免疫组化染Tfh细胞,用什么方法比较好?可以单染吗?有这样的标记物吗?双染的话用哪两个标记物?我知道Tfh高表达CD4和CXCR5,但是这两个蛋白主要都在细胞膜上,这样双染可以吗?Tfh还表达PD-1和ICOS,高表达Bcl6,CD40L。
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  • 本人想做一个复染的免疫荧光结合核酸原位杂交实验,样本是PFA处理的小鼠冰冻切片。现有Cy3(Ex, Ew: 548nm,562nm)一定要染,配以DAPI(Ex,Em: 358,461),另课题组有abcam的两只二抗,分别是FITC(Ex,Em:493,528)Alexa647(Ex,Em:652,668),目前问题
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  • 最近做免疫组化,需要双染确定细胞。预实验做了两个抗体的单染,效果都不错。但是准备做双染的时候发现实验室里的双染试剂盒两个都是抗鼠的。而我之前两个一抗都是兔抗体。现在只能重新订购了。请问前辈们有相关推荐
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  • 用两种荧光标记了细胞,confocol拍了整个细胞的图片,现在想用一些相关系数表示共定位的程度。参考了一些文献和贴吧里的帖子,大家普遍都用Pearson's correlation或者 Overlap coefficient来表示共定位程度。但我仍有几个问题不太清楚
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  • 求在做小鼠肌肉的冰冻切片的方案方案是骨骼肌冰冻切片Protocol1. 新鲜组织取材,4%多聚甲醛固定8h以上,PBS洗3遍,换20%蔗糖8h,后换 30%蔗糖5h(0.1MPBS配制,4℃)脱水至组织沉底,需要吸干组织表面液体再放进OCT进行包埋,放入液
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  • 急求指导:做细胞ELISA时包被细胞抗原时,细胞很容易脱落怎么处理?实验步骤如下:在第七步细胞很容易脱落,实验是否有什么问题?洗涤细胞有什么技术?一、福尔马林固定细胞1、用胰蛋白酶消化细胞培养瓶中的细胞;2、收
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  • 各位大神好,我在用一种多肽建立大鼠疾病模型,使用多肽和完全弗氏佐剂乳化后免疫大鼠,目前大概三周,没有和文献相似的症状,我看免疫学实验教材上写的是多肽是半抗原,免疫原性弱,不能直接用作抗原免疫动物,需要
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  • 最近着手做elisa 标曲7个浓度、第八个点加的样品稀释液作为本底,但是结果出来我的第八个本底孔的od值总是很高,一般都到0.15左右了,标曲最大浓度od值在1.6左右。。。标曲r还好,做过好几次了,总是本底很高,别人也看了一
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  • 按照常规方法进行MTT法测T淋巴细胞增殖,在最后加完DMSO,酶标仪570nm检测吸光度,有部分孔显示OVRFLW,请问这是我没调细胞密度的原因么?而且有没有有经验的前辈指点下这个实验正常吸光度的范围大概是多少呀?
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  • elisa实验求助
  • 广东省广州市番禺区
  • 10.00
  • 诚意金悬赏
  • 326人参与 | 2人投稿
  •   已结束
  • 最近在做elisa,第一次测的时候都还比较顺利,但第二次换了一个试剂盒但还是上次那个公司的,相同的指标,严格按照步骤操作,但不知道为啥标准品有吸光度值,而且做的曲线r值大于0.99,然而其他的所有样本的吸光度值和阴性
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  • 最近做石蜡组织切片,做免疫荧光共聚焦实验, 如图,可以看到图上是有很多的杂点,我应该怎么去除尼?请教一位老师,他说是因为一抗二抗配好没有离心;后来我离心了,重新做,但是离心后还是这么多杂点,究竟是什么回
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