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  • CHIP实验求助
  • 广东省广州市萝岗区
  • 10.00
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  • 最近在做CHIP 劳烦大家看一下超声的结果图 下面比较亮的条带是RNA吗?我上样前加了RNA酶的啊 这个超声条件是不是过了啊?
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  • 请教一下,PCR反应条件 95℃、5min,95℃、30s,63℃、65℃ 45s,72℃10min,35个循环。电泳条件:昨天刚换的缓冲液,就跑过两次,140恒压PCR反应体系25ul2.5ul buffer2ul dNTP0.5ul 引物0.25ul Ex-Taq酶18.25ul 水1ul 模板(昨天刚回收的DNA,未测浓
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  • 如图1.2,分别是今天下午先后跑的胶,左一是marker,我的样品是每个胶的左边四管,右边的是别人的,不用分析。第一幅图左四个孔从左到右依次为:plp1扩①未酶切,plp1扩②未酶切;plp1扩①酶切,plp1扩②酶切。 第二幅图左四个孔
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  • 请教:WB跑P62,CST的一抗,如何去除杂带? 最近一直在跑WB,P62蛋白,转膜100V,60min;血清封闭,2h;一抗用的是CST,浓度1:1000,4℃过夜;二抗1:5000,1h;跑出来后紧贴在P62蛋白下面有很明显的杂带,有哪位大神跑过P62,该如何去除
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  • 人肺癌组织冰冻切片做免疫荧光,想区分非小细胞肺癌、肿瘤相关纤维细胞(FAP),正常支气管上皮细胞(E-cadherin),巨噬细胞(F4/80),T细胞(CD3),请问肿瘤细胞用什么标志比较好,本人选了CYFRA21-1,不知道合不合适,但这个
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  • ELISA问题求助
  • 广东省广州市萝岗区
  • 5.00
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  • 447人参与 | 1人投稿
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  • 1、采血或者尿后,是37度或者4度等静置一段时间再离心,还是必须采集后马上4度离心的。2、ELISA血、尿标本是否要严格的无茵?比如试管、移液管等要消毒否?感谢各位大神,好人有好报,谢谢!
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  • 这是提蛋白后,跑胶,考马斯亮蓝染色后的结果,在图中最后一条为何会拖着长长的尾巴,蛋白浓度过高吗?可我算的是20ug/孔,急求解答
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  • 请问大神,蛋白上样量指的是每个孔的上样蛋白浓度吗?还有一个问题,在电泳恒压时,为什么跑着跑着变成了恒流,而恒流转膜时,电压却一直上不去,设置的120mA恒流,电压一直在34V左右,这是为什么呀,是因为缓冲液的问题
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  • 在37℃,1mM IPTG条件下诱导表达蛋白在沉淀里面,电泳大小差不多为41kD,28,16℃大量表达之后,沉淀和上清里面都有表达,但是大小为38kD左右,(破碎的时候时间长了一点,底部出现黑色沉淀,应该是蛋白被烧焦了),请问一下蛋
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  • 如下图所示:我用10%的胶分别跑了上面两种20多KD的分子,结果条带都非常窄,呈一条细线难以区分,重复几次之后结果大致都是如此,请大家指点一下是什么原因造成的,又该如何解决呢?
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  • 做western实验,电泳60v,30min/120v70min,转膜湿转, 300mA,50min,蛋白转膜预染marker转到膜上了是不是蛋白就转过来了呢,求教我的蛋白没有条带是怎么回事,目的蛋白34kd,97kd,分离胶配的10%,浓缩胶5%,内参有条带,是不是说你问题在转
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  • 我的目的蛋白预计大小17kD,但是考染后在11kD处出现一条很粗的条带,请问有哪些原因能导致目的蛋白变小的吗?万分感谢!另外:1.每次跑胶整个泳道会有发虚的情况,如图,尝试过低温了,效果还不是很好,请问有什么其他办
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  • 请问可以通过过表达目的蛋白,不做IP,直接跑WB后染整块胶看差异条带,再做质谱分析看这些差异蛋白从而寻找目的蛋白的影响蛋白吗?有战友见过相关文献吗
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  • western求助
  • 西藏拉萨市城关区
  • 10.00
  • 诚意金悬赏
  • 445人参与 | 2人投稿
  •   已结束
  • 我western做的是磷酸化的cx43蛋白,分子量43。一抗是ab家的,比例是1比300昨天做出来如一,我优化了实验,把转膜从原来200mA 90min,改成了60V 2h,结果如图二,求各位大神的意见,觉得我还需要哪里改进一下,我上样从原来15ul改成
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  • 我使用bl21iptg诱导蛋白表达,分子量11kd,诱导后有明显的目的条带,三次超声裂解后溶于8M尿素,然后过柱纯化。三次超声SDS胶显示蛋白存在于沉淀中,500ml诱导的菌量最后溶于10毫升尿素,10毫升蛋白悬液加入纯化柱后为一次纯化
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  • WB转膜
  • 广东省广州市越秀区
  • 10.00
  • 诚意金悬赏
  • 581人参与 | 3人投稿
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  • 我的转膜条件是湿转横流280MA,1.5h转出来,挨着膜的滤纸有红色marker以上的条带,第二张有红色以下的条带,第三张有最小的绿色的条带,膜上的所有marker颜色都很显,是转过了吗?我的分子量是106kd,38kd
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  • 质粒是Pet-41a(+) 插入了目的基因pEGF,这些前期准备我百分之百确定没问题,而且密码子也优化了,因为是在公司合成的,阅读框架什么的都没问题,正常导入了大肠杆菌BL21,我也确定已经导入了,在卡纳抗性下能生长,总之前期这
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  • 本人做WB这两次都出现了目的条带拖带,或者成了一片的状态,根本不能称之为条带了,但是转膜过程中Marker显示很好,但是有一张膜出现下面的Marker拖带,请问各位大神这是什么原因,是转膜问题还是胶的问题?求指点
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显示 1~20 项 共 67 个需求
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