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  • 转染问题
  • 浙江省杭州市上城区
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  • 最近用santa公司的siRNA做的转染情况,后面的WB验证,基因表达没有变化。细胞用的人包皮提取的成纤维细胞,传到第5代,融合约80%来做的实验。因为第一次做转染,不知道是问题到底在哪?是细胞的问题?还是小干扰RNA转染效率
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  • GAPDH-F AAGGTGAAGGTCGGAGTCAAC GAPDH-R GGGGTCATTGATGGCAACAATA 做Qpcr,内参组要么没有数值,要么差异很大
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  • 新买了一株细胞,打算冻存一批保种,但是担心冻存效果不好,想试冻存一次(冻存后一段时间复苏看看)。想请问大家冻存后几天就复苏有没有参考性?
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  • 本人是高中生,想做一个有关circRNA的实验,只有基本了解,所以需要很多实验步骤上的指导,最好可以有长期指导的,后期辅导价格可以沟通!!
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  • 对于一个基因来说有5’端和3’端之分吗?我们老师问基因的5’端上游是什么基因。我很困惑,不是只有单链DNA才有5’端和3’端之分吗?对于一个基因应该是双链DNA吧,双链DNA也有5’端和3’端吗?
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  • ELISA实验求助
  • 浙江省杭州市上城区
  • 10.00
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  • 请教肽度朋友圈,有谁做过细胞培养液中β2-microglobulinELISA实验?用哪个公司的试剂盒比较好?实验中需要注意什么问题?谢谢分享!
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  • 大家好,我最近做的sh干扰后的生长曲线,奇怪的是总是在第五天的时候有下降,第六天又升上去了。这到底出了什么问题吗?我按每孔1000和1500都试过了,这个问题经常出现,也不知道是哪里出错了。谁能帮忙解析下呢?
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  • ELISA求助
  • 浙江省杭州市上城区
  • 10.00
  • 诚意金悬赏
  • 276人参与 | 3人投稿
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  • 做ELISA时将标准曲线的数值代进去用excel的二次项方程拟合,y轴是OD值,x轴为浓度,得到标准曲线方程后,将我的样品的OD值代进去算得到浓度的数值不在标准曲线的对应数值之间是什么情况呀?而且经常会有负值出现?比如说标
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  • 组织:小鼠骨骼肌内参:GAPDH 小鼠单克隆抗体该蛋白已经提了有两个月了,提后立即加5×SDS loding buffer煮沸5分钟 之后不用-20摄氏度保存。现在跑内参出现非特异性条带,我的蛋白降解了吗?其他同批次提的蛋白,单克隆抗体 也出
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  • 请教下大家,在GSEA分析时,跳出错误显示As the phenotype choosen was continuous, only continuous class metrics are allow。这一句是什么原因,该如何解决?谢谢了!
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  • 急求子宫内膜癌不同细胞株ISK/HEC-1A/HEC-1B/KLE上ERa和ERβ表达的差别!万分感谢,急急急!
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  • RNA-seq问题
  • 浙江省杭州市上城区
  • 20.00
  • 诚意金悬赏
  • 302人参与 | 5人投稿
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  • 各位大神好,我最近在做一些RNA-seq数据,链特异性文库,在比对的时候也加了相应的参数。比对之后samtools转换成排序后的bam文件。用Stringtie进行拼接,加了-e参数,即不拼接新的转录本,以及注释文件(gtf)。得到结果后大多数
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  • 新入手细胞培养,刚买了sigma的胰岛素(I2643),腺嘌呤(A2786),甲状腺素(T6397),看了官网也不会配,哪位大神可指点一二,着实着急……谢谢!!
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  • RNAi问题求助
  • 浙江省杭州市上城区
  • 15.00
  • 诚意金悬赏
  • 307人参与 | 2人投稿
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  • RNAi是把整个基因都敲除吗?还是只敲除一部分序列。比如一段基因5000bp,我设的干扰引物在第700-1300bp,干扰后48h、72h我做荧光定量检测,但是我的荧光定量引物在第300-500bp的位置,如果是整个基因序列只有第700-1300bp这个位置的
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  • 流式测凋亡问题
  • 浙江省杭州市上城区
  • 10.00
  • 诚意金悬赏
  • 539人参与 | 3人投稿
  •   已结束
  • 最近用流式测凋亡率,造模组完全无法重复出文献的结果(本应该凋亡率很高)。就想问下各位大神,如果细胞已经发生了凋亡是不是离心的时候不太容易贴在底部?我离心完都是把液体直接倾斜倒出来的(离心是1500r/min,离5mi
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  • 膜蛋白的免疫组化结果为一条棕色的线,这到底对不对?拜托大家指教给意见
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  • 我的蛋白12KD大小,用15%的分离跑,条带总是跑的很弥散,不管是用考马斯亮蓝染色或是做western都检测不到。请问用20%的分离胶可以跑出来吗?求大神解答,谢谢。
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  • WB跑胶问题
  • 浙江省杭州市上城区
  • 10.00
  • 诚意金悬赏
  • 390人参与 | 3人投稿
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  • 15%胶,电泳80v 40min,120v到底,湿转250mA转100min,5%no-fat milk block 60min,抗体1:1000溶解在5%BSA中,抗体是Abcam的,过夜孵育,二抗1:3000个人觉得:这样的拖尾跟抗体没有关系,是跑胶的问题,本实验室用的SDS-PAGE是将tris-HCL与SDS都溶在
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  • 新鲜组织做免疫组化的相关问题:切下来的甲状腺组织用多聚甲醛固定能保存多久,我需要攒一批上机器脱一次水!老师说机器至少十五例以上才能用一次。我十五例标本至少需要收集一个月,这样我的组织能保存住吗?
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  • 我想验证某个基因mRNA在肿瘤组织切片中的表达情况,老师的意思是做个FISH,但是我从未接触过这类实验,在网上看了一些principle但还是觉得上手不行,有没有相关实验的操作文献或者是实验流程的设计可以参考,探针如何设计?
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显示 1~20 项 共 37 个需求
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