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  • 本人正在做间充质干细胞的克隆形成实验,200个细胞接种到100mm的培养皿中,培养至3-4天后,细胞就莫名的开始崩解,培养基出现一些油状点滴,镜下没有发现污染物.之前做都没有出现比情况,同样的手法,唯一变的就是培养皿
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  • 多肽合成时候,用到的氨基酸经N-Fmoc-amido-dPEG4 acid和levulinic acid耦合是什么作用呢?文献的原话:All amino acids, N-Fmoc-amido-dPEG4 acid and levulinic acid (Lev) were coupled with coupling reagents atroom temperature for 45 min each.
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  • 冰冻切片免疫组化
  • 上海市徐汇区凌云路街道
  • 10.00
  • 诚意金悬赏
  • 114人参与 | 2人投稿
  •   2天后选稿结束
  • 最近在做脱细胞材料支架,用猪耳软骨膜,冰冻切片后脱细胞,做collagen II 免疫组化,但效果非常不理想,DAB显色后,只有一小点棕黄色,步骤基本上参考石蜡切片,用酶修复方法,考虑一抗问题,但是一抗做其他组化有较好的
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  • 各位高手好,小弟做SNP位点功能效应检测,位点位于内含子区域。质粒转染适不适合用双荧光素酶检测报告基因,如果可行,做之前是否需要用qPCR测试下基因的表达情况,如果需要,麻烦指点一下咋做,谢谢!
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  • 如题,有哪位大侠知道WPRE的序列?最近实验要WPRE和polyA的效果是一样的吗?有了WPRE是否就不需要polyA了?
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  • 我克隆一个基因,3'出现了POLY A结构,但是不确定是不是,如何确定POLY A 前面的加A信号或者说怎么验证我克隆得到的就是PolyA???
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  • 请问分泌组学的质谱结果搜库得到蛋白后,怎么预测所得的蛋白是否为分泌蛋白呢?我在文献上看到一般是用Signal P 4.1预测经典分泌蛋白,用Secretome P 2.0预测肺经典分泌蛋白,有些文献还用TMHMM Server对跨膜结构进行预测,用ExoCar
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  • 1.我下室是另一种细胞,小室里是PBMC,不加药处理,那下室的培养基应该含血清吗?2.已经买了8um的corning 小室,不知道处理多长时间合适?corning的protocle建议12-24h?谢谢!
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  • ELISA法检测
  • 上海市黄浦区半淞园路街道
  • 10.00
  • 诚意金悬赏
  • 386人参与 | 3人投稿
  •   已结束
  • 最近需要做用ELISA法检测巨噬细胞分泌的IL-6,IL-10,不清楚文献上说的细胞上清液指的是什么,怎么提取细胞上清液呢,哪位大神能指点迷津一下,感激不尽。
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  • miRNA实验求助
  • 上海市黄浦区半淞园路街道
  • 10.00
  • 诚意金悬赏
  • 361人参与 | 2人投稿
  •   已结束
  • 1.miRNA是非编码RNA,(我觉得不能翻译,就是不能表达出蛋白质呀)看文献时发现可以通过免疫印迹测它的表达量,对此有疑惑2.miRNA通过与靶标mRNA结合抑制它的翻译,正常细胞和癌细胞都是抑制作用,有什么不同呢,是不是抑制能
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  • 稀释反应后糖化血红蛋白放置时间应该是多少呢?有工程师说是20分钟。如果结果偏低的话半个小时后。但实际工作中对比。从早上放到到下午三个小时。 值更高 但说明书里没有说,具体放置段时间,那应该是以完全反应为。标
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  • 新人一枚,利用茎环反转录mirna—pcr凝胶电泳(3%,80v电压)测试是否能扩增出目的条带。然而用普通的反转录与pcr条件,扩出来的非特异性条带很多,可是确没有50bp的目的条带。按照茎环反转录原理,cDNA已经可以算是特异性cDNA了
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  • 如何防止蛋白降解
  • 上海市黄浦区半淞园路街道
  • 10.00
  • 诚意金悬赏
  • 272人参与 | 2人投稿
  •   已结束
  • 细胞在培养过程中,为了防止磷酸化的蛋白被降解需要加入什么试剂呢。求大神指教。
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  • 我们之前有个腺病毒载体的干扰质粒,36000bp,说是太大了根本没可能转进细胞,细胞是小鼠脑神经瘤细胞N2A。现在想换一个载体,重新将目的序列拼接上去,问了几家公司,有说慢病毒载体的质粒转染效率高,质粒大小大概8000b
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  • 多重PCR的酶是否保真性一般?我需要扩增一个5重1.5kbp的反应,希望能保证目的片段被扩增,同时具有较好的保真性。不知道有没有好的建议?之前一直用的Qiagen Multiplex PCR kit,它完全是预混液,扩增能力很强,但不知道保真性如
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  • 刚接触生物信息学,在处理数据时候发现一个问题:在Affymetrix主页下载注释文件HG_U133A时候,预览文件可以见到探针ID、基因名称等项目,但是下载Affymetrix human gene 1.0 ST的注释文件后,预览文件项目中没有见到基因名称一栏(Aff
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  • 最近提取脐静脉内皮细胞(HUVEC),刚做了两次,第一次脐带两端先结扎再剪断,脐静脉内血液保留着,1小时后开始提取脐静脉内皮细胞时才挤出脐静脉内的血液(已凝结);第二次,脐带未结扎,挤出并清洗脐带血管内血液后
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  • 最近在学习limma的使用手册,作为一个生信小白看使用手册完全先看天书,有好多不懂的地方,有没有大神解惑一下,不胜感激。具体是这样的这几行代码适什么意思呢,我知道第三步是贝叶斯检验,但是贝叶斯检验是用来做什么
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  • 本人因为发表文章投稿后专家建议使用SILVA数据库分析16SrRNA序列,就做简单的多序列比对和构建进化树,我进入网页后发现基本是一些说明, 所以不知道怎么使用数据库进行分析, 希望各位能给我解燃煤之急!
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  • pcr实验求助
  • 上海市金山区亭林镇
  • 10.00
  • 诚意金悬赏
  • 357人参与 | 3人投稿
  •   已结束
  • 最近老师给了两条基因的CDs序列让我克隆全长,我先设计引物验证这段序列的准确性,设计了多对引物进行均增,其中靠近5'端的一直没有结果,又设计了5对引物,长片段短片段的都设计了,还是没有结果。但是其他位置的片段
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显示 1~20 项 共 66 个需求
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