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  • 最近提了一次酵母基因组,PCR鉴定是正确的,于是将基因组送测序,可是却测不出来,测序引物和我PCR的引物是一样的。不知道这是为什么?为什么PCR能P出来,测序就测不出来?
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  • 构建了一个GFP融合表达质粒,原来的蛋白是核蛋白,但是固定染核封片之后在显微镜下观察的时候发现绿色荧光很多都分布在核外,这是什么原因呢?
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  • 为什么我用RNA试剂盒提取的RNA,它的浓度一直很低啊?都没有达到50ng/ul。是不是RNA在提取过程中降解了啊?
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  • 最近遇到一个问题,困扰我一个礼拜了还是没解决啊。把来自荧光假单胞菌的基因克隆到ptrc99a质粒,然后转到DH5α进行表达,iptg诱导 0.1m诱导24h 0.5mM诱导24h,SDS-PAGE凝胶是看不出来,明显表达,测试酶活也没有 。连接的测序结果是
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  • 自配试剂大提质粒 新转化的大肠杆菌 比之前的质粒对照多出来一条第二条带下面的一条 想知道是为什么 怎么把那条带去除?
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  • 引物合成检测
  • 海南省海口市琼山区
  • 10.00
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  • 请问有人用过NCBI里面的primer designing在线软件吗?我从文献上面摘录了已知的引物,但是想知道扩增产物的序列,应该怎么设置。我把上下游引物分别粘贴在两个引物框以后,其他的都没有改动,结果只是出现了引物的Tm值之类的
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  • 要求目的启动子片段2000bp左右,扩增后凝胶电泳检测,用DNAmark2000,条带均在最下面,但是扩增不出来是什么原因?另外,启动子最多有2000bp吗?我问一个老师,说不可能有2000,最多200左右。已经做了很多次实验,排除了很多失
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  • 质粒构建问题
  • 北京市东城区东华门街道
  • 10.00
  • 诚意金悬赏
  • 295人参与 | 4人投稿
  •   已结束
  • 构建质粒能不能直接将质粒上某一段序列反过来 我是想将sv40这一段序列反向 不知道可以不
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  • 本人于去年购买了一株C2C12细胞,一开始分化都蛮好,一直用到今年过年前,年后过来后复苏的一批细胞分化状态也挺好,随着时间的推移,细胞分化率变低,考虑是代数问题,于是又复苏了一批代数比较靠前的,然而新复苏起来
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  • 测序结果求教
  • 广东省广州市白云区
  • 10.00
  • 诚意金悬赏
  • 322人参与 | 5人投稿
  •   已结束
  • 用载体构建质粒导入大肠杆菌,挑克隆摇菌后提质粒送去测序,结果发现同一个基因两个测序结果不一样,一个确实一个碱基,一个多了一个碱基,请问原因是什么啊,谢谢大神
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  • 进行细胞实验,收集细胞后,提取RNA并进行浓度和纯度检测,结果都可以,然后用 one step试剂盒进行RT,机器为罗氏LC96,反应条件也是之前摸好的,但结果却看不懂了,前面检测不了荧光信号,只有最后才有一点,不知道问题出
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  • 这是提蛋白后,跑胶,考马斯亮蓝染色后的结果,在图中最后一条为何会拖着长长的尾巴,蛋白浓度过高吗?可我算的是20ug/孔,急求解答
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  • 请教各位大侠,采用2- Δ Δ Ct法计算mRNA表达量的时候,每个样本的目的基因通过内参校正之后,得到Δ Ct。组内平均得到平均值±标准差。组间比较的时候,只能是干预组的Δ Ct平均值减去对照组的Δ Ct平均值吧?如果是这样的话,
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  • 目前在研究一个假基因的调控功能(假基因可编码RNA但是不能编码蛋白),想知道是不是非编码RNA在发挥作用,求问有没有网站或者软件可预测这个已知基因的非编码RNA?
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  • 1.在网上查找的信息以及论文来看只有miRNA与蛋白质,lncRNA,mrna的相互作用并没有miRNA之间的相互作用。2.构建共表达网络要计算基因之间的相似性对吗?那可以构建miRNA-miRNA的共表达网络吗?
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  • 各位大佬们好,本人刚开始做MDSC,有好多概念不是很理解。老板让我做MDSC的增殖实验。但是喔找个好多文献都没有关于MDSC的增殖实验说法,只有MDSC扩增后频数改变流式等方式检测。我就想问问MDSC可以用CFSE做增殖实验吗?有相
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  • 本人最近在做剂量依赖性实验,是将质粒转染到细胞中,分别设有vector GFP 未处理组以及目的质粒这四组,vector GFP组分别转染300ng,目的质粒组依次是300 250 200 150 100 50,请问是不是要保持所有组分总的质粒量一致,即300ng 是不是
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  • 大概从4月份开始,miRanda数据库就无法打开了,有哪位朋友知道怎么回事吗?还是数据库签到别的网址了呢?我需要进行miRNA与靶基因预测,谢谢!http://www.microrna.org/microrna/home.do
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  • 突变PCR,引物高GC,Tm平均值为71.71退火后电泳没条带,加了1,2,4%三个浓度梯度的DMSO68度退火后还是没条带,如何解决?谢谢!
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  • 最近在养293细胞和CHO细胞,两个细胞经过驯化至悬浮状态后转化到摇瓶中出现问题1)293细胞是尝试过2/3/4*10的5次方接种细胞量,但是都无明显增殖;2)CHO细胞是刚转入摇瓶第一代增殖正常,传代后就开始基本不增殖;细胞在离心
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