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  • 最近在用同源重组的方法构建质粒,目的片段A加到载体1和载体2上,涂板后菌落PCR均检测不到目的片段。而目的片段B和目的片段C很轻松就能加到载体1。片段A已测序正确,使用试剂相同,三个目的片段加的同源臂相同,双酶切载
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  • 如题,构建某基因点突变质粒转入细胞株中研究其功能,但细胞株基因组野生型的也在那,会对功能有影响吗?换句话说,细胞株基因组野生型的基因在那,突变的质粒转进去有何用?问题可能有点傻傻的,但我还真的不懂,求
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  • 我用NCBI查了我目的基因的cDNA序列是2881个碱基,但是查出的蛋白质序列却有1124个氨基酸,两者之间并不是三倍左右的关系,请问各位高手为什么会出现这种问题呢?种属和对应的基因库编码都是一样的,也不知道为什么~正在完成
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  • 我最近做不同时间段0h,24h,48h的感染实验,怎么计算某个基因的相对表达量呢?内参为actin,是24h,48h都与oh对比吗?
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  • 本人课题是做小鼠脊髓,提取RNA后测量浓度只有70-80ng/ul.跑的荧光PCR,每次内参CT值都有25左右,目的基因也都是在二十几,PCR加大样本量也没用,对照组是正常无CT值的,请问这种情况下我该如何调整,本人刚开始接触试验,求各
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  • 请问如果构建某个基因的表达质粒,如果把基因的起始密码子ATG其中的某个碱基换成其他碱基,那突变型的表达质粒是不是很有可能无法表达该基因,请问为什么?
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  • 最近在学些靶基因预测 分别用rnahybrid mirnada 和targetscan做了预测 然后取了交集,发现结果有点太多了 所以想咨询下 初步筛选各个软件预测结果的标准是什么,比如rnahybrid用mfe的绝对值筛选的话 我们一般取多少以上的 mirnada和targ
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  • western求助
  • 西藏拉萨市城关区
  • 10.00
  • 诚意金悬赏
  • 280人参与 | 2人投稿
  •   已结束
  • 我western做的是磷酸化的cx43蛋白,分子量43。一抗是ab家的,比例是1比300昨天做出来如一,我优化了实验,把转膜从原来200mA 90min,改成了60V 2h,结果如图二,求各位大神的意见,觉得我还需要哪里改进一下,我上样从原来15ul改成
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  • 求助各位大神,chip qpcr 阳参没有出来阳参是试剂盒里的Anti-RNA聚合酶,阳参没出来是怎么回事呢?
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  • 如题,有哪位大侠知道WPRE的序列?最近实验要WPRE和polyA的效果是一样的吗?有了WPRE是否就不需要polyA了?
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  • 我使用bl21iptg诱导蛋白表达,分子量11kd,诱导后有明显的目的条带,三次超声裂解后溶于8M尿素,然后过柱纯化。三次超声SDS胶显示蛋白存在于沉淀中,500ml诱导的菌量最后溶于10毫升尿素,10毫升蛋白悬液加入纯化柱后为一次纯化
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  • 养的mrc5成纤维细胞,长的特别慢,一周左右t25的瓶子才能长满,而且细胞形态不好,细胞中间有很多亮点,请问这是怎么弄的啊?
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  • 整体实验外包
  • 广东省广州市萝岗区
  • 20000- 30000
  • 免费招标
  • 709人参与 | 4人投稿
  •   失败
  • 我在NCBI上下载一段全长序列,但是与其它物种的同源基因比对过程中发现,该段目的基因相对其它同源基因而言少至少60bp。根据经验而言,这段序列长度算比较短的。但是NCBI已标志是全长序列,所以请教大神们,这种情况下,
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  • 用人使用crispr 敲除大肠杆菌的基因吗?sgRNA是怎么设计的?使用的是哪个网站?我看到张峰设计软件及很多软件选择物种里都没有细菌这个选项?怎么弄?
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  • 下载了芯片注释文件,里面没有对应的gene symbol,竟然连GB、entrez gene id都没有了,只有下面几项,求问怎么样讲探针名转化为gene symbol,谢谢!#ID = transc ript_cluster_id#probeset_id =#seqname =#strand =#start =#stop =#total_probes =#gene_assignment =#mrna_a
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  • 在做血浆RNA提取工作,发现癌症患者血浆RNA大多都提不出来,而用同样的方法对照血浆却提得好好的,想着是不是癌症患者血浆rnase活性或含量高一些,也有文献支持这种说法,就想测一下血浆中rnase含量来着,但是大多公司的产
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  • 转染问题
  • 浙江省杭州市上城区
  • 10.00
  • 诚意金悬赏
  • 247人参与 | 2人投稿
  •   已结束
  • 最近用santa公司的siRNA做的转染情况,后面的WB验证,基因表达没有变化。细胞用的人包皮提取的成纤维细胞,传到第5代,融合约80%来做的实验。因为第一次做转染,不知道是问题到底在哪?是细胞的问题?还是小干扰RNA转染效率
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  • 下载了芯片注释文件,里面没有对应的gene symbol,竟然连GB、entrez gene id都没有了,只有下面几项,求问怎么样讲探针名转化为gene symbol,谢谢!#ID = transc ript_cluster_id#probeset_id =#seqname =#strand =#start =#stop =#total_probes =#gene_assignment =#mrna
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  • GAPDH-F AAGGTGAAGGTCGGAGTCAAC GAPDH-R GGGGTCATTGATGGCAACAATA 做Qpcr,内参组要么没有数值,要么差异很大
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显示 81~100 项 共 705 个需求

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