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  • 学习抑制性消减杂交的原理中,说产物a(单链tester cDNA)没有引物结合位点所以不能扩增。这一点不能理解,产物a的一端不是也有接头吗,为什么引物不能识别?求大神指教!
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  • 最近在做脱细胞材料支架,用猪耳软骨膜,冰冻切片后脱细胞,做collagen II 免疫组化,但效果非常不理想,DAB显色后,只有一小点棕黄色,步骤基本上参考石蜡切片,用酶修复方法,考虑一抗问题,但是一抗做其他组化有较好的
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  • 求免疫创新思路
  • 广东省广州市越秀区
  • 10.00
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  • 最近在设计课题,就是用什么蛋白能加速瓦勒氏变性,常规的瓦勒氏进程和巨噬细胞相关蛋白加快没有创新性,要找创新一点的思路,如T,B,NK细胞中的蛋白,谁能给我点建设性意见?
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  • 各位高手好,小弟做SNP位点功能效应检测,位点位于内含子区域。质粒转染适不适合用双荧光素酶检测报告基因,如果可行,做之前是否需要用qPCR测试下基因的表达情况,如果需要,麻烦指点一下咋做,谢谢!
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  • 最近在用同源重组的方法构建质粒,目的片段A加到载体1和载体2上,涂板后菌落PCR均检测不到目的片段。而目的片段B和目的片段C很轻松就能加到载体1。片段A已测序正确,使用试剂相同,三个目的片段加的同源臂相同,双酶切载
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  • 如题,构建某基因点突变质粒转入细胞株中研究其功能,但细胞株基因组野生型的也在那,会对功能有影响吗?换句话说,细胞株基因组野生型的基因在那,突变的质粒转进去有何用?问题可能有点傻傻的,但我还真的不懂,求
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  • 我用NCBI查了我目的基因的cDNA序列是2881个碱基,但是查出的蛋白质序列却有1124个氨基酸,两者之间并不是三倍左右的关系,请问各位高手为什么会出现这种问题呢?种属和对应的基因库编码都是一样的,也不知道为什么~正在完成
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  • 我最近做不同时间段0h,24h,48h的感染实验,怎么计算某个基因的相对表达量呢?内参为actin,是24h,48h都与oh对比吗?
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  • 本人课题是做小鼠脊髓,提取RNA后测量浓度只有70-80ng/ul.跑的荧光PCR,每次内参CT值都有25左右,目的基因也都是在二十几,PCR加大样本量也没用,对照组是正常无CT值的,请问这种情况下我该如何调整,本人刚开始接触试验,求各
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  • 请问如果构建某个基因的表达质粒,如果把基因的起始密码子ATG其中的某个碱基换成其他碱基,那突变型的表达质粒是不是很有可能无法表达该基因,请问为什么?
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  • 最近在学些靶基因预测 分别用rnahybrid mirnada 和targetscan做了预测 然后取了交集,发现结果有点太多了 所以想咨询下 初步筛选各个软件预测结果的标准是什么,比如rnahybrid用mfe的绝对值筛选的话 我们一般取多少以上的 mirnada和targ
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  • western求助
  • 西藏拉萨市城关区
  • 10.00
  • 诚意金悬赏
  • 350人参与 | 2人投稿
  •   已结束
  • 我western做的是磷酸化的cx43蛋白,分子量43。一抗是ab家的,比例是1比300昨天做出来如一,我优化了实验,把转膜从原来200mA 90min,改成了60V 2h,结果如图二,求各位大神的意见,觉得我还需要哪里改进一下,我上样从原来15ul改成
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  • 求助各位大神,chip qpcr 阳参没有出来阳参是试剂盒里的Anti-RNA聚合酶,阳参没出来是怎么回事呢?
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  • 如题,有哪位大侠知道WPRE的序列?最近实验要WPRE和polyA的效果是一样的吗?有了WPRE是否就不需要polyA了?
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  • 我使用bl21iptg诱导蛋白表达,分子量11kd,诱导后有明显的目的条带,三次超声裂解后溶于8M尿素,然后过柱纯化。三次超声SDS胶显示蛋白存在于沉淀中,500ml诱导的菌量最后溶于10毫升尿素,10毫升蛋白悬液加入纯化柱后为一次纯化
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  • 养的mrc5成纤维细胞,长的特别慢,一周左右t25的瓶子才能长满,而且细胞形态不好,细胞中间有很多亮点,请问这是怎么弄的啊?
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  • 整体实验外包
  • 广东省广州市萝岗区
  • 20000- 30000
  • 免费招标
  • 943人参与 | 4人投稿
  •   失败
  • 我在NCBI上下载一段全长序列,但是与其它物种的同源基因比对过程中发现,该段目的基因相对其它同源基因而言少至少60bp。根据经验而言,这段序列长度算比较短的。但是NCBI已标志是全长序列,所以请教大神们,这种情况下,
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  • 用人使用crispr 敲除大肠杆菌的基因吗?sgRNA是怎么设计的?使用的是哪个网站?我看到张峰设计软件及很多软件选择物种里都没有细菌这个选项?怎么弄?
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