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  • 一代测序在扩增的时候使用固定引物,而引物往往需要结合在基因片段的3`和5`末端,所以即使能读到末端的碱基,也可能是引物的序列,所以通常需要通过RACE方法测定3`和5`的序列。本人只对二代测序有模糊的了解,不知道二代
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  • 免疫组化求助
  • 上海市黄浦区半淞园路街道
  • 10.00
  • 诚意金悬赏
  • 47人参与 | 1人投稿
  •   17天后投稿截止
  • 年前,我在做大鼠脑组织炎症因子IL-1beta的免疫组化,但是做出来以后神经元深染很严重基本上每个神经元都染上了,而且苏木素染色两分钟,自来水反蓝10min,片子上什么都没有,一抗是abcam的,IL-1beta用的1:1000浓度,表达就是这
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  • qpcr求助
  • 湖南省长沙市天心区
  • 5.00
  • 诚意金悬赏
  • 59人参与 | 0人投稿
  •   4天后投稿截止
  • 大家好,请问向培养基里,加入非必须氨基酸,为什么颜色变黄了呢?是正常现象嘛? 在Transwell小室中测电阻时,总觉得0.5ml的培养液不能完全覆盖内侧的电极呀!
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  • uniprot使用求助
  • 北京市东城区东华门街道
  • 10.00
  • 诚意金悬赏
  • 130人参与 | 2人投稿
  •   7天后投稿截止
  • 各位大神,请问uniprot里面检索蛋白,哪一部分是看蛋白质结构域?想看与目标蛋白相互作用的蛋白,在Interaction部分是看Subunit structure还是Binary interactions?以蛋白质RAP1A_HUMAN为例,能否举个例子演示一下?
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  • 想看某细菌的表面蛋白是否可结合DNA(非特异性DNA片段),并想知道是否蛋白质存在某特异位点与DNA结合,用什么方法?
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  • 我想做课题circRNA调控miRNA/HIF-1α轴对心肌梗死的影响,现已经查到miR-199a-5p/HIF-1α互作,却不会使用预测网站去查询miR-199a-5p的上游circRNA。请技术专家为我查询miR-199a-5p的上游circRNA,并告知我查询过程和结果,必要时请配插图。
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  • 做RT-PCR,让TAKARA合成的引物,需要做预实验吗?可以直接上样品做吗?逆转录的cDNA需要分装保存吗?
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  • 向各位高手请教,我在用荧光定量验证lncRNA的变化。跑出的CT值,B—action还比较正常,都是15.16左右,但是实验组的CT值一般都在25到31之间,我看了有资料说CT值最好在15到25之间。请有经验的大佬们,谈一下你们的见解!如果说引
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  • 请问miranda,miRDB预测结果怎么能下载下来呢,下载下来后怎么能取交集呢,新手,刚开始学,实在是找不着方法,请指点
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  • 我是实验新手,虽然在网上看了N多免疫组化的操作步骤,但是有一个细节始终困惑我:石蜡切片的时候直接用盖玻片封片?如果封片,做染色的时候先把玻片拿掉然后染完了再盖上? 还是另外一种答案:石蜡切片时不封片,等染
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  • 六孔板种板细胞,Trizol提取星形胶质细胞的总RNA,几次得到的浓度、纯度都很低,甚至有时加异丙醇离心后见不到沉淀,请问有什么方法可以改进,有哪些细节需要注意?
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  • 请问可以通过过表达目的蛋白,不做IP,直接跑WB后染整块胶看差异条带,再做质谱分析看这些差异蛋白从而寻找目的蛋白的影响蛋白吗?有战友见过相关文献吗
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  • 免疫荧光求助
  • 黑龙江省哈尔滨市五常市
  • 10.00
  • 诚意金悬赏
  • 187人参与 | 1人投稿
  •   1天后选稿结束
  • 大家好,用鬼笔环肽染SiH19的肺上皮支气管细胞,孵育一小时后洗完三次PBS再用DAPI染色,在洗三次PBS,在激光共聚焦显微镜下显示核出现绿色荧光,说明有BPNE-DNA加合物出现,按理说应该没有绿色荧光,这是为什么
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  • 连接前,酶切结果还是1kb-1.5kb连接后的重组子,做酶切鉴定,目的片段变成了2.5kb左右(左1,左2),而且比质粒片段的亮度弱很多(质粒片段大小合适,约5000bp)想不通,是酶切后胶回收出了问题,还是连接过程出了问题,还是
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  • 求助一下大家转录组测序结果是不是都需要经过RT-PCR进行验证才能进行数据分析,或者只是为了加强转录组测序结果的可靠性?
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  • SEER数据库求助
  • 湖南省长沙市天心区
  • 10.00
  • 诚意金悬赏
  • 225人参与 | 2人投稿
  •   已结束
  • 最近看到一篇发表在JAMA Oncology上的文章,作者通过挖掘SEER数据库研究了初次诊断为乳腺癌脑转移的发病率和预后。我想把这种思路用在另外一种癌的肝转移上,在导出SEER数据的时候遇到了困难。我应该如何操作才能导出患者肿
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  • 大家好,最近在做elisa的时候,做细胞上清液,一个六孔板里每个孔细胞数不同,生长速度不同,培养基体积也不绝对相同,那测出来的浓度结果能说明什么呢,需不需要数一下细胞呢?感觉也不太准。
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  • 外泌体鉴定
  • 北京市东城区东华门街道
  • 10.00
  • 诚意金悬赏
  • 219人参与 | 1人投稿
  •   已结束
  • 今年开始接触血浆外泌体,现在正想要做外泌体电镜,不知是否有靠谱的公司推荐呢?另外,我用的是qiagen试剂盒77064,现在鉴定是否也要用这个试剂盒提外泌体送鉴定才行?还是可以不一致,选择超速离心?请前辈指导,谢谢!
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  • SEER数据库求助
  • 广东省广州市越秀区
  • 10.00
  • 诚意金悬赏
  • 199人参与 | 2人投稿
  •   已结束
  • 最近看到一篇发表在JAMA Oncology上的文章,作者通过挖掘SEER数据库研究了初次诊断为乳腺癌脑转移的发病率和预后。我想把这种思路用在另外一种癌的肝转移上,在导出SEER数据的时候遇到了困难。我应该如何操作才能导出患者肿
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